三种提取剂提取菟丝子多酚的抗氧化研究

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1、.泉州师范学院毕业论文(设计)题目三种提取剂提取菟丝子多酚的抗氧化研究化生学院生物科学(食品质量与安全方向)专业10级学生姓名黄勇学号101004004指导教师董乐职称副教授完成日期2014-1-5教务处制....三种提取剂提取菟丝子多酚的抗氧化研究化学与生命科学学院生物科学(食品质量与安全方向)专业101004004黄勇指导教师董乐副教授【摘要】本文采用甲醇、乙醇、丙酮三种有机溶剂在料液比1:30、超声波辅助10min、65℃1h条件下提取菟丝子多酚,并对提取物进行抗氧化测定、比较。通过测定羟自由基,DP

2、PH的半清除率比较提取物的抗氧化活性,实验结果表明:60%甲醇溶液提取的提取物抗氧化作用较强【关键词】菟丝子、多酚、有机溶剂、抗氧化、自由基清除率。1前言菟丝子(Cuscutachinensis)是旋花科、菟丝子属植物菟丝子的干燥成熟种子,始载于《神农本草经》,又称菟丝实、龙须子、黄丝、黄藤子、豆寄生、吐丝子、无娘藤米米、萝湾了,维吾尔语名称为艾普提莫[1]。是常用的补益中药,具有补阳益阴、固精缩尿、明目止泻的功效[2]。菟丝子主要含黄酮类、糖苷、氨基酸及微量元素,还有胆甾醇、芸苔甾醇、谷甾醇、豆甾醇及三萜

3、酸类、生物碱、香豆素、鞣酸等化学成分。菟丝子主要产于河北、陕西、山东、山西、黑龙江、江苏、新疆、吉林等地。2000年版《中国药典》收载为旋花科植物菟丝子CuscutachinensisLam.的干燥成熟种子[3-4]菟丝子及南方菟丝子为一年生缠绕性寄生草本。生于海拔200~3000m的田边,山坡阳处、路边灌丛或海边沙丘,通常寄生于豆科、菊科、苋科、唇形科、蒺藜科等20多个科的近百种植物上。分布伊朗,阿富汗向东至日本,朝鲜,南至斯里兰卡,马达加斯加,澳大利亚[5]。菟丝子属植物在中国大部分地区都有分布,但种的

4、分布则具有一定的地域性。在中朝俄边境的珲春地区,主要是金灯藤、南方菟丝子、啤酒花菟丝子和单柱菟丝子[6];在云南,主要是菟丝子、大花菟丝子和金灯藤[7];在山东,则主要是菟丝子、南方菟丝子、金灯藤和啤酒花菟丝子[8]。目前,菟丝子药材商品主要是菟丝子及同亚属的南方菟丝子的种子,并以南方菟丝子较多[9]。全国有三大主产区,按产量大小排序为内蒙古、宁夏、新疆;次产区为山西、甘肃、江苏、东北。按质量排序,内蒙古的质量最好,次之为宁夏、新疆[10]。菟丝子的药用价值非常之高,专家学者不断的发觉其功能强大,本文就菟丝

5、子的提取物抗氧化比较深入研究菟丝子,通过对其多酚的抗氧化作用的研究更加了解它,更充分的利用这一资源,加强利用率!2材料与方法2.1实验材料与仪器菟丝子:购与内蒙古赤峰市药材市场甲醇、乙醇、丙酮、浓硫酸、酒石酸亚铁、DPPH、水杨酸、FeSO4、H2O2,所有试剂均为分析纯。2.2实验仪器...高速粉碎机;恒温干燥箱;TDL-5000B离心机(飞鸽牌);台式天平;旋转蒸发器(上海中生科技有限公司);V-1100D可见分光光度计(上海美普达仪器有限公司);数据恒温水浴锅HH-4(国华电器有限公司);DK-80三

6、孔电热恒温水槽(上海齐欣科学仪器有限公司);KQ-600E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);pH计;电子精密天平FA1004N,上海菁海仪器有限公司。3实验方法3.1菟丝子原料的制备将菟丝子干燥12h,粉碎、过64目筛,于冰箱中低温存放备用。3.2菟丝子多酚的提取取三个洁净、干燥的锥形瓶,用电子天平称取2.000g菟丝子粉末放于锥形瓶底,按照料液比1:30分别加入60%的甲醇、乙醇、丙酮,轻微震动混匀,用保鲜膜封口放入超声波清洗器中用超声波辅助提取20min,放入水浴提取装置用65℃水浴提取1h,将

7、水浴后的混合液体移入离心管中,天平配平后放入离心机中,设定4000r/min提取时间10min。离心后取部分上层清液置于具塞比色管中,其余的置于锥形瓶中密封中放入冰箱保存。3.3菟丝子多酚含量的测定3.3.1没食子酸标准曲线的制作准备8支25mL具塞试管,取没食子酸溶液标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL于编号0至9号的试管中,用蒸馏水稀释至10mL,再加入1mL福林酚试剂,混匀后再加入5mL5%碳酸钠溶液,充分混匀,并在室温放置60min后加入蒸馏水定容至25mL,在

8、波长为750nm下测定相应的吸光值。以0号试管为空白对照调零,以每根试管中没食子酸的量为横轴,以对应的吸光值为纵轴,制作标准曲线[9]。3.3.2菟丝子多酚含量的测定在装有上清液的具塞比色管中按1:1的比例加入酒石酸亚铁溶液,再加入PH为7.5的缓冲溶液定容,并轻缓地来回倒置,再静置5min后比色,算出吸光值,带入标准曲线算出菟丝子多酚的浓度。多酚含量=样品溶液多酚浓度×稀释倍数×体积菟丝子多酚得率=多酚含量/样

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