酶免法检测丙肝病毒核心抗原在献血者筛查中应用研究

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1、酶免法检测丙肝病毒核心抗原在献血者筛查中应用研究【摘要】目的：分析基层血站大规模筛查献血者HCV感染采用ELISA方法联合检测抗HCV和HCVC抗原的可行性。方法：采用ELISA法检测献血者样本抗HCV和HCVC抗原，结果：与HCVPCR法进行比较分析。结果：献血者780份抗HCV初复检阴性样本中，HCVC抗原检测结果均为阴性。56份抗HCV初复检阳性样本中，HCVC抗原检测阳性16份，HCVPCR阳性17份；11份抗HCV初检或复检阳性样本中，HCVC抗原检测阳性1份，HCVPCR阳性1份；17份抗HCV初检或复检或初复检结果灰区样本中，HCVC抗原

2、检测阳性3份，HCVPCR阳性4份。结论：ELISA法检测HCVC抗原灵敏度及特异性均较高，适合基层血站开展对献血者HCV大规模筛查，也适合基层医院开展对患者输血前HCV感染的检测。【关键词】丙型肝炎病毒；核心抗原；核酸检测【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1004-7484(2013)03-0595-01丙型肝炎主要经过血液传播，是一种严重的经血传播疾病，目前没有较好的预防和治疗方法。我国是丙型肝炎感染大国，在一般人群中，丙型肝炎病毒感染率达3.2%。我国献血法规定，对献血者必须进行HCV检测，目前多数血站筛查献血者是否感染HCV采用

3、不同厂家试剂两遍检测抗-HCVo酶免疫法检测抗-HCV窗口期长（大约70天），而HCV感染者在发病前12天即可具有传染性［1］。酶免法检测HCVC抗原可缩短HCV窗口期至15天［2］,是否适合献血者大量筛查，我们对此进行了分析。1材料和方法1.1样本从本血站2012年6月至12月无偿献血者中抽选酶免法抗-HCV初检、复检均阳性样本56份，抗-HCV初检、复检均为阴性样本780份，仅抗-HCV初检或仅复检阳性样本11份，灰区样本（初检或复检有一次灰区或初复检均灰区，灰区二cutoffX0.8）17份，共计864份样本。1.2试剂和仪器抗-HCV初检试剂为

4、上海科华生物工程股份有限公司提供，批号201207041等；抗-HCV复检试剂，英科新创（厦门）科技有限公司提供，批号2012065815等;HCVCAg检测试剂，湖南康润药业有限公司提供，批号20121001；深圳爱康UranusAE200全自动酶标仪；美国ABI7300型基因扩增仪，试剂由深圳凯杰生物工程有限公司提供，批号20121101c1.3方法献血者血清标本经抗-HCVELISA试剂初、复检后，将所需标本分装并置-8（rc条件下存放，确保被检标本仅冻融一次。864份样本均检测HCVC抗原。将抗-HCV初检、复检均阳性和仅初检或复检阳性及灰区血

5、清标本共84份样本同时进行HCVC抗原和HCVRT-PCR检测。具体操作方法和结果判断，严格按照说明书要求进行，记录检测结果。2结果2.1780份抗-HCV初检、复检均合格的献血者样本中，ELISA检测HCVC抗原结果均为阴性(780/780)。2.256份抗-HCV初检、复检均阳性的献血者样本中，HCVc抗原检测阳性样本16份，HCVPCR检测阳性样本17份。仅抗-HCV初检或仅复检阳性11份样本中，HCVc抗原检测阳性样本1份，HCVPCR检测阳性样本1份。抗-HCV检测结果灰区样本17份中，HCVc抗原检测阳性样本3份，HCVPCR检测阳性样本4

6、份。见附表1。检测结果采用x2检验，P>0.05,84份样本中HCVC抗原酶免疫法检出阳性率与HCVPCR方法阳性检出率无显著性差别。两种方法检出阳性符合率达90%以上。3讨论卫生部发布的《血站技术操作规程》【2012］中明确要求，献血者丙型肝炎病毒(HCV)感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种：1)采用2个不同生产厂家的ELISA试剂检测HCV抗体或联合检测HCV抗原和抗体；2)采用1种ELISA试剂检测HCV抗体或联合检测HCV抗原和抗体，采用1种试剂检测HCV核酸。大多数血站目前广泛选用的检测方法是采用2个不同生产厂家的ELISA试剂

7、检测HCV抗体，抗HCV试剂因不同生产厂家所用抗原片段及抗原质量不同，试剂的灵敏度和特异性存在一定差异，从而导致抗-HCV检测结果的不一致。ELISA检测抗-HCV窗口期长，可出现漏检和假阳性情况［3］。应用PCR方法检测HCV特异性强,灵敏度高，是HCV感染辅助确证技术之一，但该方法要求条件高，操作复杂，需具备较高的设备、设施及技术条件，检测费用也高，易出现假阳性和假阴性，并不适合基层血站对献血者大规模筛查。本实验结果显示与检测抗HCV相比，ELISA方法检测HCVC抗原具有较高的特异性(780/780)；对抗-HCV初检和复检均阳性、仅初检或复检阳

8、性、检测结果灰区等84份血清标本，ELISA方法检测HCVC抗原的检测结果(20/84)与HC