tgf-β1对人椎间盘髓核细胞凋亡的作用研究

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1、万方数据中图分类号UDCR681．5061硕士学位论文学校代码．!Q533密级．公珏TGF．fil对人椎间盘髓核细胞凋亡的作用研究TGF：filprotectshumanintervertebraldiscnucleuspulpouscellsfromapoptosis作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：戚德胜临床医学外科学湘雅二医院康意军教授论文答辩日期型丝窆矽答辩委员会主席擞中南大学二0一四年五月万方数据硕士学位论文原创性声明学位论文原创性声明

2、IIIIllIIIIIfMIIIIIIIIIIY2688522本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师

3、指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：]醴垒鱼日期：硷!里年』月卫日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内

4、容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：j鲢遮盘坠导师签名日期：她年三月弘日万方数据硕士学位论文中文摘要TGF．B1对H202诱导的人椎间盘髓核细胞凋亡的作用研究摘要目的：有关TGF．Bl对椎问盘髓核细胞凋亡的作用研究甚少，且对人的髓核细胞凋亡的作用尚无研究，本研究通过建立人髓核细胞体外培养细胞株，予以双氧水诱导细胞凋亡探讨TGF．Bl对人髓核细胞凋亡的影响，从而为治疗椎间盘退变提供新的理论依据。方法：本研究取材从手术台上取10例青壮年腰椎爆裂性骨折的椎问盘组织，从中分离出髓核组织并利用胰酶、II型

5、胶原酶消化后，成功分离出髓核细胞在DMEM／F12培养液中培养，培养成功后进行传代，采用二代髓核细胞进行实验。实验中予以H20：诱导凋亡。研究分组分为空白对照组、TGF-p1处理组、H202处理组、H202+TGF—p1(10ng／m1)处理组、H202+TGF—p1(100ng／m1)处理组共五组，H／02+TGF—p1(10ng／m1)处理组与H202+TGF．p1(100ng／m1)处理组予以H202诱导凋亡前以不同浓度TGF—pl预处理5小时，五组均在48小时后分别行DAPI染色免疫荧光和流式细胞仪技术检测髓核细胞的凋亡率。结果：1．通过DAPI染色发现加入H20

6、2后出现大量凋亡的髓核细胞，流式细胞仪检测细胞凋亡率为28．5％，证明H202诱导人髓核细胞凋亡成功；2．通过流式细胞仪检测发现10ng／mlTGF—p1处理后能使髓核细胞的凋亡率从28．5％凋亡降低为20．71％，且差异具有统计学意义(P<0．05)；100ng／mlTGF．p1处理后能使髓核细胞的凋亡率降¨万方数据硕士学位论文中文摘要低至13．06％，与10ng／mlTGF．131处理组相比较，差异具有统计学意义(P<0．05)。结论：1．H202诱导人髓核细胞凋亡后，通过对细胞凋亡形态和凋亡率的检测，发现TGF．131可以抑制人髓核细胞凋亡，且100ng／mlTGF

7、—p1比10ng／mlTGF一131对人髓核细胞凋亡抑制程度更大；2．TGF一131不能完全阻断人髓核细胞凋亡。关键词：椎问盘退变；细胞凋亡；TGF．131分类号：R681．5万方数据硕士学位论文英文摘要TGF—B1protectshumanintervertebraldiscnucleuspulpousAbstractcellsfromH202inducedapoptosisObjects：ThereisfewresearchabouttheimpactofTGF-p1onintervertebraldiscnucleuspulpouscellsapoptosis，ev

8、enmorenoresearchonhumannucleuspulpouscellsapoptosis．Thisstudyestablishsthehumandegeneratednucleuspulpouscellstraininvitro，usinghydrogenperoxidetoinduceapoptosis，andtrytoexploretheeffectofTGF一131onhumannucleuspulpouscellsapoptosisviaimmunofluorescenceandflowcytometry