异育银鲫皮肤粘孢子虫病的病原和组织病理研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M090104207上海海洋大学硕士学位论文题目：异育银鲫皮肤粘孢子虫病的病原和组织病理研究PathogenandhistopathologystudiesofMyxosporean(Myxozoa:Myxosporea)英文题目：infectingtheskinofAllogynogeneticCrucianCarp(Carassiusauratusgibelio)专业：临床兽医学研究方向：水产动物医学姓名：竹攸汀指导教师：陆宏达教授二〇一二年四月上海水产大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，

2、独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海水产大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海水产大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□本学位论文属于不保密■学位论文作者签名：指导教师签名

3、：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注杨先乐上海海洋大学教授主席房文红东海水产研究所研究员委员胡鲲上海海洋大学副教授委员邱军强上海海洋大学讲师秘书上海海洋大学国家答辩地点答辩日期2012-5-16水生动物病原库上海海洋大学硕士学位论文异育银鲫皮肤粘孢子虫病的病原和组织病理研究摘要异育银鲫（Carassiusauratusgibelio）是银鲫卵子与异源精子所产的后代。江苏省扬州地区是生产异育银鲫鱼苗鱼种的主要地区之一，每年为异育银鲫成鱼养殖地区提供大量的鱼苗和鱼种。异育银鲫繁殖期为每年的4月下旬至5月中旬，近几年的6月上旬左右起，该地区培育过程

4、中的异育银鲫鱼苗体表会出现一种由粘孢子虫寄生而出现孢囊的疾病，发病使得鱼体变形、消瘦、游动困难，严重时导致鱼苗大量死亡，累积死亡率约在10%-60%，鱼苗死亡以及病鱼销售困难给鱼苗养殖户带来巨大的经济损失。因此有必要开展该病的病原和病理研究，为进一步的研究和防治该病的发生提供基础。为了确定粘孢子虫在何种条件下进行形态学观察和测量时最精确，本文以引起该粘孢子虫病的病原粘孢子虫作为样本，将其新鲜成熟孢子用生理盐水制成的水浸片作为对照组，将蒸馏水制成的新鲜孢子水浸片，中性甲醛、70%酒精、95%酒精、Bouin’s液、2.5%戊二醛、A.F.F液和G.A.F液保存24小时后孢子的孢子长、宽、厚、极囊

5、长和宽的测量数据分别与对照组进行统计学分析，结果表明，蒸馏水对孢子的形态略微膨胀，但影响不大；所有的固定液均会对孢子的形态产生影响，中性甲醛、酒精、Bouin’s液和2.5%戊二醛会使孢子产生一定收缩，95%酒精使孢子收缩最严重，70%酒精和Bouin’s液次之；2.5%戊二醛对于保存后的粘孢子虫的形态影响最小，最适于保存孢子；中性甲醛对孢子形态的影响稍大于2.5%戊二醛，但在没有条件使用2.5%戊二醛时，也可用中性甲醛替代。在确定了鉴定方法后，通过光镜、扫描电镜和18SrDNA序列对比，确定该病原粘孢子虫为武汉单极虫（Thelohanelluswuhanensis），并对其进行了形态学重描述

6、和系统发育分析。成熟孢子壳面观为瓜子状，前端狭窄而尖锐，后部钝圆，两片壳瓣前端形状不对称，其中一个壳瓣前端有乳头状突起，缝面观为厚梭形，缝脊直，孢子壳瓣底部内侧有1-4个“V”形褶皱，部分孢子后部包围有膜状鞘，膜状鞘两侧起始的位置不同，离孢子前端的垂直距离为5.03-16.69（10.37±2.36）µm。极囊1个，近似球形，位于孢子前端，极丝7-10圈。2个圆形或近三角形的极囊核，分别位于极囊后部左右两侧。Lugol’s碘液染色后嗜碘泡呈棕黄色，形状为圆形或椭圆形。孢子的测量结果：孢子长21.92-26.93（24.55±0.95）µm，孢子宽11.43-15.48（13.72±0.98）µ

7、m，孢子厚10.83-14.14（11.80±0.45）µm；极囊长9.64-12.79（11.54±0.68）µm，极囊宽8.14-10.28（9.12±0.45）µm，极丝长I上海海洋大学硕士学位论文158.49-179.22（170.71±5.67）µm（n=20），膜状鞘外表面距孢子壳瓣表面最远距离为1.73-4.39（2.73±0.60）µm。亚甲基蓝染色表明极丝为中空管状。获得了部分1