CyHV-2引起的异育银鲫鳃出血病组织病理及致病机理研究

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1、索取４．．：Ｓ９１７４／７２１０：１１１２０１０Ｕ？密级＾｜：公汁南京砰疤犬＃．＾＇ｆｇ博士学位论文＇＇．’’‘－、／々：二ｉ．ｙ（，，暴ｊ‘气‘沾夕／＇择ｉ１：＂？、編：獻ＨｔｏＢｒｎＢＡ■麵緣灌麻ＣｙＨＶ－２引起的异育银鲫鳃出血病组织病理及致病机理研究＇’：．＇＇：：上：乂：ｖ５ｔ—指导教师：王文教授養．丨＇培养单位：生命科学学院纖一级学科：：生物学Ｈ＇级学科：水生生祿．及＇兔Ｗ＊ｆ－？，＇ｙ／ｙ＇１．，／ｙｊ＾｛ｖｉ＇完成时间：２０１８年３月１０日．議：｝：答辩时间：２０１

2、８年５月２５日＇＂４＊＇：＇＇咬■？－＊＇？？；－－－＊＇＊？＇■：？ｒ：－＇－Ｎｔｋ、．［．．１－ｔＶ．５｛ｌ：Ｖ—’．■、＊．．：＇：Ｖ：夂參＾１鐘益Ｖｒ？丨厶％试沒＾叙：丫？邊匕每好学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作和取得的研究成果。本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构己经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研宄所做的贡献均己在论文中作了声明并表示了谢意。学位论文作者签名：

3、日期：学位论文使用授权声明研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属南京师范大学。学校有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可以借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容，可以采用影印、复印等手段保存、＇汇编本学位论文。学校可以向国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档。（保密论文在解密后遵守此规定），允许论文被查阅和借阅保密论文注释，：：本学位论文属于保密论文密级二保＾密期限为。年＾学位论文作者签名：指导教师签名：日期：日期：＃摘要鲷鱼是我国最为常见的淡水养殖鱼类，广泛分布于全国各地，是我国大宗淡水鱼类养殖结构

4、的重要组成品种。２０１２年，全国鲫鱼养殖产量近２４５万吨，居，（Ｃｆｌｗｒａ加ｇ沩ｅ／我国淡水鱼品种第五位异育银鲫／ｏｖａｒ．ｓｉｎｇｕｏｎｅｎｓｉｓｊ）是近二十年来鲫鱼养殖推广最为广泛的品种，但自２０１２年以来，一一一异育银鲫发生了鳃出血病，种严重的新型病害在主要养殖区广泛传播，给养殖生产造成巨大的经济损失。鳃出血病不同于鲫鱼的常规病害，它具有低水温发病、传染性强、发病迅速、致死率高，更重，、难以预防和控制等特征要的是国内以前未有发病报道发病原因不明，流行规律也不清楚，这严重威胁了异育银鲫养殖业发展。因此，迫切需，查明发病规律，要开展新型疫病的流行病学

5、调查；开展病原鉴定查明病因；建立有效检测方法理一；同时阐明其致病机，为下步进行异育银鲫鳃出血病的防治奠定了基础。１．开展流行病学调查根据《江苏省水产养殖病害测报规范》，开展流行病学调查，得出鳃出血病°￣：（１）１５２５（２）的基本流行规律多发于春季和秋季，水温Ｃ是发病高峰期；患病鱼鳃部出血明显，病鱼尾鳍、背鳍末端色素减退、明显发白，病鱼鳔上有明３一二龄成鱼４显出血性瘀斑；（）具有明显传染性，主要危害龄幼鱼与；（）病原具有较强的宿主专一一５性，不感染同养殖环境内的其它淡水鱼类）；（集中投喂方式引起更高的传染率。２．异育银鲫鳃出血病的组织与超微病理学研

6、究及病原鉴定组织病理结果显示，鳃小片融合，：病鱼鳃瓣处出现血细胞浸润伴有上皮细一胞坏死和脱落；鳃瓣内成团的吞噬细胞带有大小不的胞浆空泡，显示具有弱嗜碱性；病鱼肾脏肾小球有局灶性坏死病变，毛细血管壁扩张；肾小球肥大细胞核，严重空泡化，固缩、碎裂。患病鱼脾脏内血细胞和淋巴样细胞浸润出现严重空泡化。许多脾脏细胞核染色质边缘化，有些出现核碎裂。患病鱼肝细胞核增大，有核内包涵体，细胞核肥大伴有核固缩，同时有严重的空泡化；肝内胆管显示有，管壁细胞肿胀彼此融合炎症，导致管壁粗糙和异常。患病鱼肠上皮细胞脱落，，肠粘膜受损结缔组织有增生，。对病鱼的相应组织进行病理半定量评估病

7、理变Ｉｍｗ化最显著的是肾脏，其次是鳃、脾脏和肝脏，。超微病理观察发现病鱼鳃、脾脏、７０－２００ｎｍ肾脏有病毒感染，在细胞质内具包膜病毒粒子１。病毒在细胞质内有，进行成熟加工过程，病毒粒子穿越高尔基网进入带有糖蛋白的囊泡在囊泡内形成包膜病毒，通过细胞质衣壳的二次包裹。，最终在细胞质中形成成熟病毒粒子利用鲤科拖疹病毒聚合酶基因的特异性引物从病鱼鳃、肾脏和脾脏组织中ＰＣＲ扩增出３６２