能量限制对肉仔鸡脾脏和法氏囊基因表达效应的研究

《能量限制对肉仔鸡脾脏和法氏囊基因表达效应的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河南农业大学硕士学位论文能量限制对肉仔鸡脾脏和法氏囊基因表达效应的研究姓名：张建宏申请学位级别：硕士专业：动物遗传育种与繁殖学指导教师：黄艳群201206摘要为了研究30％能量限制对肉仔鸡脾脏与法氏囊差异表达基因的影响，试验采集48日龄健康雌性AA肉仔鸡脾脏与法氏囊组织，能量限制组和自由采食绢各20个样本，以单个个体为重复单位，采用Oenefishing“IDEGPremix试剂盒进行脾脏与法氏囊差异表达基冈的筛选，使J4j半定量RT—PCR进行差异表达基因的鉴定。试验结果如下：(1)通过Genefishing“RT—PCR著异表达试验在脾脏组织中发现了33个筹异表达条带，其中差异表达片段

2、早上凋趋势的为16条，足F‘洞趋势的为I7条，同时出现两条特异性表达条带，分}{0为P4—2和P12-4，其中P4．2特异性表达条带往白由采食组特异性表达，Pl2．4特异性表达条带在能鼙限制绸晕现特异性表达。33条差异表达条带中，成功同收、克隆、测序了21个差异表达EST；在法氏囊组织中发现了40个著异表达条带，差异表达片段中表达掣上调趋势的为27条，表达早卜．凋趋势的为13条，能量限制组出现l条特异性表达条带命名为F8—2。成功同收、克隆和测序的片段为17个。(2)通过、卜定量RT—PCR的验证表明：脾脏组织共计l：j个著异表达EST，9个早明显著异，4个无著异显示；法氏囊绸织共计11个

3、差异表达BST，7个早明显著异，4个无差异显示。(3)通过生物信息学分析表明：脾脏差异表达ESI、中有4个能够找剑高度同源的已知基冈，4个有同源推测基冈，另外l：3个是未知功能基冈。法氏囊脾脏差异表达ESll中有4个能够找到高度同源的已知基因，2个有同源推测基冈，另外11个是米知功能基冈。本研究通过筛选和鉴定能量限制肉仔鸡脾脏雨I法氏囊芳异显示的表达序列标签，为进一步研究能量限饲对肉仔鸡免疫器官的影响提供重要的信息，为入类从分子水平上研究能耸限制对免疫机理的影响提供参考。关键词：AA肉仔鸡；能量限制：法氏囊；脾脏；蓐异表达河南农业大学2012届硕士学位沦文EffectsofEnergyRe

4、strictionondifferentgeneexpressioninBroilerspleenandbursaSupervisors：ViceProf．HuangYanqunMasterCandidate：ZhangJinhongAbstractInordertostudythe30％energyrestrictioninbroilerspleenandbursadifferentgeneexpression，thisexperimentchoseof48一day—oldhealthyfemaleAAbroilerspleenandbursatissue(energyrestricti

5、onandfreedomgroup)，eachgroup20samples，asingleindividualfortherepeatunits．weusedGenefishingTMDEGPremixKittoselectspleen’Sandbursa’Sdifferentiallyexpressedgenes，usedsemi—quantitativeRT-PCRfortheidentificationofdifferentiallyexpressedgenes．Followingwerethetestresults：(1)ThroughtheGenefishingTMRT-PCR，

6、wedetected33differentiallyexpressedgenesinbroilerspleen，inwhich16differentiallyexpressedfragmentshowedaupwardtrend，adownwardtrendfor17,while2differentiallyexpressedfragmentwerespecificexpressionwhosewerenamedrespectivelytheP4—2andP12-4，P4—2showedspecificexpressioninfreedomgroup，theexpressionofP12—

7、4wasspecificinenergyrestrictedgroup．21diffel‘entiallyexpressedESTweresuccessfuliyrecovery，cloningandsequencinginbroilerspleen．Inbroilerbursa，wedetected40differentiallyexpressedgenes，inwhich27differentiallyexpress