恒河猴犬瘟热病毒的分离鉴定及疫苗免疫研究

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1、博士学位论文学校代码：学号：恒河猴犬瘟热病毒的分离鉴定及疫苗免疫研究10023B2009438IsolationAndCharacterizationAndVaccinesOfCanineDistemperVirusFromRhesusMonkeys所院：昆明医学生物学研究所姓名：郑颖指导教师：廖国阳研究员范泉水研究员导师小组：邱薇研究员张富强研究员姜述德研究员学科专业：病原生物学研究方向：病毒疫苗完成日期：2012年5月25日恒河猴犬瘟热病毒的分离鉴定及疫苗免疫研究目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3前言⋯··⋯··⋯·⋯⋯···⋯··⋯⋯··⋯··⋯··⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯一·⋯⋯⋯6日U舌⋯”⋯一⋯“”⋯一“⋯“⋯一“⋯“⋯一⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯一”⋯”⋯0研究内容⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6第一部分恒河猴犬瘟热感染的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第一章病理学研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯O

3、GI!⋯81．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．3讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．4小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16第二章病原的分离鉴定及实验动物感染实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯291．3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351

4、．4小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37第三章犬温热病毒的全基因组测序及基因遗传进化分析⋯⋯⋯381．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯381．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l1．3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7l1．4小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯74第二部分疫苗免疫效果及特异性免疫研究⋯⋯⋯DQO00·DODQOD⋯751．1材料与方法⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯761．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯781．3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯801．4小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82总结论⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯····⋯⋯⋯·⋯⋯··83恒河猴犬瘟热病毒的分离鉴定及疫苗免疫研究文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯84参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯120附录⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131附录l英文缩略词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132附录2主要试剂配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132附录3恒河猴CDV基因全序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯136致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143作者简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯144独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯147恒河猴犬瘟热病毒的分离鉴定及疫苗免疫研究摘要病原体的跨种传播是造成新

7、发传染病主要原因之一。近年来，随着生态环境的变化，麻疹病毒属的犬瘟热病毒(CDV)由于对动物流行因素的适应和病毒的变异使其自然感染宿主范围在不断扩大，CDV的宿主范围已由传统的犬科(Canidaefamily)、鼬科(Mustelidaefamily)及浣熊科(Procyonidaefamily)扩展到了食肉目(CarnivoaOder)所有8个科及偶蹄目猪科(Suidaefamily)、鳍足目海豹科(Phocidaefamily)，猴属动物通常对CDV并不敏感，但近年来，CDV大规模迅速在中国和同

8、本的灵长目猕猴属(MacacaLacepede)动物中传播，并导致感染动物出现肺炎等严重临床症状，幼龄恒河猴死亡率高达30％，成年恒河猴死亡率约5％。CDV打破种间壁垒，从非灵长类动物扩散到灵长类的猴，使CDV的公共卫生意义同益突出。目前甚至从人的变形性骨炎(Paget)患者的骨组织中检测到了CDV的核酸和抗原，最新研究证实CDV在体外可感染人的前破骨细胞，并可在破骨细胞中增殖，表明CDV自然宿主可能己扩展到人类，犬瘟热可能成为由犬传染给人的狂犬病之外的第二个烈性病毒