野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠apelin及其受体的变化及西地那非的影响

《野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠apelin及其受体的变化及西地那非的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、温州医学院硕士学位论文野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠apelin及其受体的变化及西地那非的影响姓名：庞玲霞申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：龚永生；范小芳2012-05-26温州医学院硕士学位论文野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠apelinD,．其受体的变化及西地那非的影响中文摘要目的：研究野百合碱(monocrotaline，MIC)诱导的肺动脉高压大鼠血浆、肺组织中新的小分子活性肽apelin}及其受体(APJ)蛋白、基因表达的变化，以探讨apelin．APJ系统在野百合碱诱导肺动脉高压中的作用，并观察西地那非的影响。方法：1、野百合碱肺动脉高压

2、动物模型的复制。清洁级SD雄性大鼠60只，体重180,-一2209。随机均分为4组：正常对照(NC)、野百合碱组(MIC)、野百合碱+盐酸西地那非低剂量组(25mg／kg，SL)、野百合碱+盐酸西地那非高剂量组(50mg／kg，SH)，4组均用标准饲料在同等条件下喂养。MIC组、SL组、SH组腹腔一次性注射MIC(60mg／kg)造模。SL、SH组在注射野百合碱后2周经腹腔注射相应剂量的盐酸西地那非，每天1次，NC组腹腔注射相同剂量的生理盐水。大鼠饲养到规定时间后，用戊巴比妥钠(35mg／kg)腹腔麻醉，采用右心导管法测量mPAP，颈总动脉插管测量平

3、均颈动脉压(mCAP)，分别称取右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S)的重量，计算RV／(LV+S)作为右心室肥大指数。以mPAP、mCAP和RV／(LV+S)作为模型指标。2、肺血管重建的评估。Masson三色染色测定肺细小动脉管壁面积／管总面积(WA／TA)、管腔面积／管总面积(CA／TA)}及中膜厚度(PAMT)，光镜观察肺细小动脉显微结构变化。3、放射免疫(R队)法测定血浆和肺组织匀浆apelinl拘蛋白含量。4、逆转录．多聚酶链反应(RT．PCR)半定量检测右心室和肺组织apelinmRNA及APJmRNA基因水平。5、WesternB

4、lot检测右心室与肺组织APJ蛋白表达水平。结果：1、肺动脉高压动物模型指标。MIC组的mPAP、RV／(LV+S)均显著高于NC组；mPAP：MIC组较NC组高134．36％(P<0．01)，SL组较MIC组低21．10％(P>0．05)，SH组较MIC组低35．08％(P0．05)，SH组较MIC组低39．34％(P<0．05)；mCAP：四组间无显著性差异(P>0．05)。4温州医学院硕士学位论文2、Massort三色染色结果

5、。大鼠肺细小动脉WA／TA、PAMT和CA／TA的变化：光镜下与正常组相比，MIC组见肺动脉内膜内皮细胞损伤增生、肺细小动脉管壁显著增厚，中层显著增厚，内弹力层扭曲明显，管腔明显狭窄。在直径50～2001un之间的肺细小动脉中，中层明显增厚，管壁／管腔比增加；西地那非能明显改善上述病理改变。WA／TA：MIC组比NC组高104．41％(P<0．01)，而SL组比MIC组低20．67％(P<0．os)，SH组比MIC组低46．68％(P<0．01)。PAMT：MIC组比NC组高了160．59％(P<0．01)，SL组比MIC组低了27．81％(P<0．

6、05)，SH组比MIC组低57．59％(P<0．01)。而CA／TA．MIC组比NC组低27．56％(P<0．01)，SL组比MIC组高15．39％(P<0．05)，SH组比MIC组高34．75％(P<0．01)。3、血浆apelin-36蛋白含量，MIC组较NC组低51．74％(P<0．01)，SH组较MIC组高81．53％(P<0．01)。4、RT-PCR结果。肺组织中，APJmRNA：MIC组较NC组低72．97％(P<0．01)，apelinmRNA：MIC组与NC组间无统计学差异(P>O．0S)。5、免疫组化结果。光镜观察肺组织qbapel

7、in及APJ主要分布于肺血管内外膜，血管平滑肌细胞较少分布，各级支气管上皮细胞分布较多。6、WesternBlot结果。肺组织中APJ蛋白表达水平MIC组较NC组低46．88％(P<0．01)，SL组较MIC组高19．12％(P>0．05)，SH组较MIC组高120．59％fP<0．05)。结论：l、野百合碱所诱导的肺动脉高压大鼠肺组织qhapelin受体APJ的基因与蛋白明显下调，提示该受体的障碍可能与肺动脉高压的发生发展有关。2、西地那非能使肺组织APJrnRNA的表达明显上调，血浆、肺组织匀浆中apelin蛋白水平显著升高，提示西地那非减轻野百

8、合碱诱导肺动脉高压与右心室肥大的作用可能部分与调节apelin／APJ系统有关。关键词Apelin；APJ：