瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用

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1、分类号：R614学校代码：10392学科专业代码：100217学号：200901190福建医科大学硕士研究生毕业论文瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用RemifentanilProconditioningProtectsagainstIschemia-ReperfusionInjuryinHumanHepatocyte学位类型：医学硕士所在学院：协和临床医学院研究生：李丽珍学科、专业：麻醉学导师：陈文华副教授研究起止日期：2011年1月至2012年3月答辩日期：2012年6月7日二○一二年六月万方数据万

2、方数据目录英文词缩略表……………………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………………………2英文摘要……………………………………………………………………………4引言……………………………………………………………………………6第一部分：瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用……………91.实验材料…………………………………………………………………………92.实验方法………………………………………………………………………103.统计方法………………………………

3、………………………………………174.结果………………………………………………………………………175.讨论………………………………………………………………………25第二部分：瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤保护作用的浓度依赖性…………………………………………………………………………311.实验材料………………………………………………………………………312.实验方法………………………………………………………………………313.统计方法………………………………………………………………………324.结果……………

4、…………………………………………………………325.讨论………………………………………………………………………38结论…………………………………………………………………………39参考文献…………………………………………………………………………40致谢…………………………………………………………………………43综述…………………………………………………………………………44万方数据英文词缩略表ALTAlanineAminotransferase丙氨酸氨基转移酶ASTAspartateAminotransferase天门

5、冬氨酸氨基转移酶DMEMDulbecco’smodified达尔伯克（氏）改良的Eagle’smedium伊格尔（氏）培养基DMSODimethylSulfoxide二甲基亚砜EDTAEthylenediaminetetraaceticAcid乙二胺四乙酸二钠LDHLacticDehydrogenase乳酸脱氢酶MDAMalondialdehyde丙二醛MTT3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3-(4，5-二甲基噻唑-2)-3,5-di-phenytetrazoliumromide2，

6、5-二苯基四氮唑溴盐PBSPhosphateBufferedSaline盐酸盐缓冲液PMSFPhenylmethanesulfonylFluoride苯甲基磺酰氟1万方数据瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用摘要第一部分：瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的保护作用目的探讨瑞芬太尼预处理对人肝细胞缺血再灌注损伤的是否有保护作用。方法培养人肝细胞株HL7702，体外模拟建立肝细胞缺血再灌注损伤模型。将培养的肝细胞分为6组，分别为正常培养组（N组），缺血再灌注组（IR组），瑞芬太尼预处理组（RE组）：RE

7、1组：瑞芬太尼0.5ng/ml预处理1h；RE2组：瑞芬太尼5ng/ml预处理1h；RE3组：瑞芬太尼50ng/ml预处理1h，生理盐水组（NS组）。正常培养组正常条件下培养，其他组模拟缺血8h，再灌注4h。到终末时间点测定：（1）MTT法检测肝细胞活力；（2）乳酸脱氢酶释放法进行肝细胞繁殖和毒性的检测；（3）全自动生化仪检测细胞培养上清液AST、ALT、LDH的含量；（4）MDA试剂盒检测肝细胞内MDA含量；（5）倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态学改变。结果RE2组细胞活力比IR组和NS组升高，但比N组降低，细胞

8、死亡率、细胞上清液中AST、LDH水平以及细胞内MDA含量比IR组和NS组降低，但比N组升高，差异有统计学意义（P<0.05）；而RE1和RE3组与IR组、NS组各项指标差异无统计学意义（P>0.05）。倒置相差显微镜下可见缺血再灌注损伤后细胞间隙增大，细胞出现皱缩、变圆、体积变小，亮度增加，甚至脱落。RE2组细胞损伤程度减轻，贴壁细胞数量增多