蓝光照射致视网膜色素上皮细胞凋亡途径的研究

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1、遵义医学院硕士学位论文蓝光照射致视网膜色素上皮细胞凋亡途径的研究姓名：吕建平申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：蔡善君201205遵义医学院硕士学位论文蓝光照射致视网膜色素上皮细胞凋亡途径的研究1蓝光照射致视网膜色素上皮细胞凋亡途径的研究中文摘要目的探讨线粒体凋亡通路是否参与蓝光照射诱导体外培养的人RPE细胞凋亡过程。方法实验分为5组：A无光照组；B单纯光照组：C光照+硝苯地平组：D光照+CalphostinC组，E光照+PMA组。用2000±500Lx强度的蓝光照射人RPE细胞6h，24h后终止培养后，采用Western—blots法检测各组RPE细胞内B

2、ax、Bcl一2、Bcl—xL、caspase一9蛋白表达量的变化。结果Westernblot检测显示：无光照组和单纯光照组均可见Bax及caspase一9蛋白条带，分子量分别位于23KD及37KD；与无光照组比较，单纯光照组的Bax及caspase-9蛋白表达增加，差异有统计学意义(乒一4．409，一4．168：P=-O．012，0．014)。无光照组和单纯光照组均可见Bcl一2及Bcl—xL蛋白条带，分子量分别位于26KD及30KD；与无光照组比较，单纯光照组Bcl一2及Bcl—xL蛋白表达减少，差异有统计学意义(t=7．575，6．068；P=O．002，

3、O．004)。与单纯光照组比较，光照+PMA组CaSpase一9蛋白表达升高(旷O．013)；光照+硝苯地平组及光照+CalphostinC组caspase一9蛋白表达无统计学意义(旷0．091，0．681)：光照+硝苯地平组与光照+CalphostinC组比较差异无统计学意义(P=O．047)；光照+PMA组caspase一9蛋白表达高于光照+CalphostinC组及光照+硝苯地平组，差异有统计学意义(俨0．024、0．001)。结论(1)蓝光致体外培养的人RPE细胞凋亡过程中caspase-9表达增强，凋亡抑制基因Bcl-2及bcl-xl表达下降，凋亡促进

4、基因Bax蛋白表达增强；(2)线粒体凋亡通路参与蓝光照射诱导体外培养的人RPE细胞凋亡过程；(3)PKC通路可能参与了蓝光致体外培养人RPE细胞凋亡．关键词视网膜色素上皮；凋亡；线粒体；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶；蛋白激酶C1基金项目：国家自然科学基金(81060079)；贵州省教育厅重点项目(黔教科)2008034号作者单位：563003遵义医学院附属医院眼科2遵义医学院硕士学位论文蓝光照射致视网膜色素上皮细胞凋亡途径的研究Thepathwayofblue-lightinducedapoptosisinhumanretinalpigmentepithelialce

5、llsinvitroAbstractobjectiveSdudymitochondrialapoptoticpathwaywhichisinvolvedinblue-lightinducedapoptosisinhumanretinalpigmentepithelialcellsinvitro．MethodsExperimentsweredividedinto5groups，groupAwaslight—freegroup，groupBsimplelightgroup，groupClight+nifedipinegroup，groupDillumination+

6、CalphostinC，groupElight+PMAgroup．Humanretinalpigmentepithelialcellswereexposedto20004-500Lxblue—lightfor6hoursandstopedcultivationpost-exposure24hours．Westem-blotswasusedtodetectexpressionofBax，Bcl-2，Bcl-xLandcaspase一9protein．ResultsBaxandcaspase一9proteinstripwereobservedatmolecularw

7、eight23KDand37KDrespectivelyingroupcontrolandlight．Comparedwithcontrol，proteinexpressionofBaxandcaspase-9Washigherthangrouplight，thedifferencewasstatisticallysignificantO=7．575，6．068，P=O．002，O．004)．Bcl一2andBcl—xLproteinstripweredetectedatmolecularweight26KDand30KDrespectivelyingroupc

8、ontrolandlig