玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导eales病动物模型的研究

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1、遵义医学院硕士学位论文玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导Eales病动物模型的研究姓名：尚利晓申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：蒋模；蔡善君201205遵义医学院硕士学位论文玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导gales病动物模型的研究玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导Eales病动物模型的研究摘要目的：探讨卡介菌纯蛋白衍生物玻璃体腔注射建立Eales病动物模型。方法：l、分组及致敏方法：将成年雄性SD大鼠(N=75)随机分成五组。实验I组(n=15)：用浓度为lms／ml的HS—Agp35+等量FICA

2、(弗式不完全佐剂)0．1ml大鼠一侧后足垫皮内注射，另一侧注射0．1mlBCG—PPD5U+FICA，14天后玻璃体腔注射BCG—PPD5U；实验II组(n=15)：用浓度为Img／ml的HS-Agp35+等量FICA(弗式不完全佐剂)0．2ml大鼠一侧后足垫皮内注射，14天后玻璃体腔注射BCG—PPD5U；实验III(n=15)、IV(n=15)及V组(n=15)致敏方法同实验I组；实验III组14天后玻璃体腔注射HS．Agp3510Ug；实验Ⅳ组14天后玻璃体腔不打药；实验V组(对照组)14天后玻璃体腔注

3、入0．9％NS0．1ml。2、观察指标：大鼠眼部常规检查、荧光素眼底血管造影(fluoresceinfundusangiography，FFA)、视网膜铺片、HE染色病理切片、免疫组化检测视网膜VEGF、PDGF，监测血液中辅助T淋巴因子(IFN．Y，TNF—Q，IL．4)，并作相关性分析。结果：l、眼部常规检查：(1)．实验I工I组的葡萄膜炎反应明显；(2)．实验I组、实验II组3个月后个别大鼠虹膜表面发现新生血管；(3)．实验Ⅳ组、V组(对照组)未能发现阳性体征。2、FFA：(1)．实验I组、实验II组可

4、产生以视网膜血管病变为主的眼内炎症反应；(2)．实验III组可产生以脉络膜病变为主的眼内炎症反应；(3)．实验Ⅳ组、V组(对照组)未能发现阳性体征。3、视网膜铺片：(1)．实验I组、实验II组可产生以视网膜血管病变为主的眼内炎症反应，但形态上无法区分两组别的血管炎程度；(2)．实验III组可产生以脉络膜病变为主的眼内炎症反应，但炎症可累及视网膜血管；(3)．实验Ⅳ组、V组(对照组)未能发现阳性体征。4、免疫组化：(1)．VEGF抗体：阳性面积实验I组>实验IT组>实验III组；(2)．PDGF抗体：实验I组有

5、阳性结果，实验II、III、均未得到阳性结果。5、病理切片：见视网膜增厚、皱褶、结构紊乱，视网膜血管扩张、充血，I、II组鼠内界膜不规整，有少量的血管内皮细胞核突破内界膜，并且内界膜下的细胞增殖，排列紊乱，I组偶见视网膜表面或视网膜前新生血管芽，III遵义医学院硕士学位论文玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导Eales病动物模型的研究组可见内界膜下细胞排列稍不规则。6、血液中辅助T淋巴因子(IFN．v，TNF．0【，IL．4)：(1)．IFN．Y在模型鼠血清中的浓度含量和正常对照组鼠的浓度含量分别为(385．1

6、6±19．72)(200．38±15．84)；TNF．Q分别为(25．75±2．04)(12．14±1．16)；IL-4分别为(13．18±0．34)(11．56±0．36)；模型鼠组血清中IFN．Y，TNF．Q，IL．4浓度高于正常对照组，差异有统计学意义(P<以01)。(2)．Thl和Th2代表因子的比值IFN—Y／IL-4在模型鼠组和正常对照组的比值分别为(29．20±1．29)(17．35±1．35)，模型组高于正常组，差异有统计学意义(尸<现01)。结论：1．用单一Hs．Agp35抗原、Hs．Agp

7、35抗原联合BCG．PPD大鼠足垫皮内致敏后，玻璃体腔注射BCG。PPD可产生视网膜血管炎症；且联合致敏组的视网膜血管炎的模型与人类Eales病更接近；2．联合致敏ENes病制模过程中BCG．PPD起主导作用；3．通过向致敏大鼠玻璃体腔注射BCG．PPD诱导的Eales病模型，T淋巴细胞亚群的失平衡可能参与了EMes病的免疫机制；【关键词】：Eales病；人视网膜可溶性抗原第35段抗原决定簇(HS—Agp35)；卡介菌纯蛋白衍生物(BCG．PPD)视网膜血管炎；动物模型；辅助T淋巴细胞因子；遵义医学院硕士学位

8、论文玻璃体腔注射卡介菌纯蛋白衍生物诱导Eales病动物模型的研究AnimalmodelofEalesdiseaseinducedbyintravitrealinjectionofpurifiedBCG—PPDproteinAbstractobjective：ToestablishanimalmodelofEalesdiseaseinducedbytheintravitrealinjectionofp