ages对人白血病细胞增殖、耐药的影响及汉防己甲素干预作用的研究

《ages对人白血病细胞增殖、耐药的影响及汉防己甲素干预作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、东南大学硕士学位论文AGEs对人白血病细胞增殖、耐药的影响及汉防己甲素干预作用的研究姓名：王钿钿申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：陈宝安2012-05-19中文摘要AGEs对人白血病细胞增殖、耐药的影响及汉防己甲素干预作用的研究东南大学医学院内科学研究生：王钿钿导师：陈宝安目的(1)本研究旨在探讨晚期糖基化终末产物(Advancedglycationendproducts，AGEs)对K562及K562／A02细胞增殖的影响及汉防己甲素(Tetrandrine，Tet)对AGEs诱导细胞增殖

2、的干预作用，并初步探讨其机制。(2)观察AGEs是否与K562及K562／A02细胞对阿霉素(Adriamycin，ADM)耐药性相关。方法(1)用CCK8(CellCountingKit8)法观察AGEs对K562及K562／A02细胞增殖及Tet对AGEs诱导下细胞增殖的影响，流式细胞术(Flowcytometery，FCM)测细胞凋亡率及晚期糖基化终末产物受体(Receptorofadvancedglycationendproducts，RAGE)的表达，并用半定量逆转录聚合酶链反应(Rev

3、ersetranscriptpolymerasechainreaction，RT-PCR)检测RAGEmRNA相对表达水平。(2)用CCK8法观察ADM或ADM与AGEs对K562及K562／A02细胞增殖的影响，并计算半抑制浓度(IC50)值，FCM测细胞凋亡率及P．糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)的表达，并用半定量RT-PCR检测多药耐药基因l(Multigrugresistancegene1，mdrl)mRNA相对表达水平。结果(1)AGEs可促进K562及K562／A02细

4、胞增殖，呈浓度依赖性(rl=0．954，Pl<0．05；r2=O．965，P2<0．05)，0—48小时细胞增殖随时间延长而增强(P<0．05)，72小时增殖减少。Tet与AGEs共作用K562及K562／A02细胞48小时，可通过诱导细胞凋亡抑制AGEs促细胞增殖作用，呈浓度依赖性(rl=0．995，Pl<0．05；r2=0．977，P2<0．05)。K562细胞及K562／A02细胞RAGE阳性率分别为(18．38+0．46)％及(19．88士0．40)％，两细胞无明显差异(P>0．05)，1

5、00、200及400mg／LAGEs作用48小时后，K562细胞RAGE阳性率分别为(24．42士0．412)％、(28．80士0．77)％及(37．70士0．66)％，K562／A02细胞分别为(25．81士0．79)％、(30．68士1．36)％及(36．38士1．49)％，两细胞分别与对照组相比RAGE表达增高(尸<0．05)，AGEs各浓度组间有明显差异(P<0．05)，提示AGEs可增强K562及K562／A02细胞RAGE的表达，且RAGE随着AGEs浓度升高逐渐增加(rl=0．997

6、，PI<0．05：r2=0．983，／'2<0．05)。1．5、2．0及4．OI，tmol／LTet与200mg／LAGEs共作用48小时后，K562及K562／A02细胞分别与AGEs(200mg／L)组相比，RAGE阳性率无明显差异(P>0．05)，Tet各浓度组间亦无明显差异(19>0．05)，提示Tet与AGEs共作用K562及K562／A02细胞，AGEs诱导的RAGET东南大学硕士学位论文表达的增加未见明显改变。100、200及400mg／LAGEs作用48小时后，K562及K562／

7、A02细胞分别与对照组相比，RAGEmRNA灰度值增高(P<0．05)，AGEs各浓度组间也有明显差异(P<0．05)，提示AGEs可增强K562及K562／A02细胞RAGEmRNA的表达，且RAGEmRNA随着AGEs浓度升高逐渐增加(rl=0．994，Pl<0．05；r2=0．982，／'2<0．05)。1．5、2．0及4．01umol／LTet与200mg／LAGEs共作用48小时后，K562及K562／A02细胞分别与AGEs(200mg／L)组相比，RAGEmRNA灰度值无明显差异(扮

8、0．05)，Tet各浓度组间亦无明显差异(P>0．05)，提示Tet与AGEs共作用K562及K562／A02细胞，AGEs诱导的RAGEmRNA表达的增加未见明显改变。(2)AGEs分别作用K562及K562／A02细胞24小时及48小时，ADM对两种细胞的IC50值与不加AGEs组比较差异无统计学意义(P>0．05)，一定量ADM作用48小时后，两种细胞凋亡率与AGEs及ADM共作用下两种细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0．05)；AGEs作用K562及K562／A02细胞