17-β雌二醇及雌激素受体α在itp的表达及作用研究

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1、学校代码：10023学号：20098405中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文17一B雌二醇及雌激素受体a在ITP的表达及作用研究所院：血液病医院血液学研究所姓名：王宏梅导师：杨仁池教授学科专业：内科学研究方向：止血与血栓疾病的基础与临床完成日期：二零一二年五月目录第一部分17一B雌二醇及雌激素受体Q在ITP的表达及作用研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·l中文摘要英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯结果⋯⋯⋯{寸论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．结论⋯⋯⋯⋯．13参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．36第二部分利妥昔单抗在ITP治疗中的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。英文摘要⋯．对象与方法⋯结果⋯⋯—}!f论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结论⋯⋯⋯参考文献⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯—48⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯70附录一：英文缩写和代码⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。附录--：主要仪器和试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。103附录三在学期间发表论文和会议报告⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯105致谢⋯⋯⋯⋯

3、．独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．108学位论文版权使用授予书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯109中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文第一部分17一f3雌二醇及雌激素受体Q在ITP的表达及作用研究摘要的：研究免疫性血小板减少症(thrombocytopenia，ITP)患者血浆17—13雌二醇水(17-13estradiol，E2)及外周血单个核细胞(peripheI’albloodmonocytesPBMCs)

4、激素受体Q(estrogenreceptor，ERn)的表达水平，探讨其在ITP发病机制中作用。方法：采集外周血，ELISA方法检测外周血血浆E2、游离睾酮(FT)水平；实时定量RT-PCR方法检测ERQ的mRNA水平；流式方法检测患者外周血单个核细胞CDl9+CD204B细胞的ERQ的蛋白表达水平；PBMCs培养，分E、I、E+I、K组，分别给药物E210一Omol／L，雌激素阻断剂ICll82，78010一mol／L，E2及I，培养基，培养72小时，检测细胞增殖情况，ELISA方法检测上清干扰素一y(

5、IFN—Y)表达水平，实时定量RT—PCR方法检测所培养单个核细胞的IFN一丫的mRNA水平；外周血单个核细胞培养，分E、T、K组，分别给药物E210一ol／L，雌激素拮抗剂他莫昔芬(tamoxifen)1ff二mol／L，培养基，培养72小时，流式方法检测CD44细胞中CD4CD25+FoxP3+Treg细胞比例。结果：儿童及青少年组患者，治疗后未缓解组(n=t1)血浆E2水平(169．49±33．81pmol／L)显著高于正常对照组(n=29)(82．72±63．55pmol／L)(P

6、年患者，活动期未用药患者(n=41)，用药未达缓解患者(n=23)，完全缓解患者(n=13)及健康对照(n=49)，各组问血浆E2水平无显著差异(P>O．05)。活动期未治疗组患者(n--48)血浆FT水平(46．71±59．89pmol／L)显著低于正常对照组(n=57)(46．7l±59．89pmol／L)(P

7、达完全缓解组(n=19)(2．43±0．94)(P

8、药未达缓解患者外周血PBMCs的ERBmRNA表达水平(n=8)(中位数4．27884，0．079539—18，837)显著高于正常对照组(n=lO)(P