mir-145靶作用gmfβ基因调节卵巢癌细胞侵袭和转移

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1、中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：塾坚日期：呈殳堡垒笸丑篁固中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即

2、：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：目录一、摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、．3二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．5三、论文前‘言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．27讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．35结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．38四、本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39五、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40六、附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45在学期间科研成绩⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一56个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯57·中文论著摘要·miR．145靶作用GMFB基因调节卵巢癌细胞的侵袭和转移目的本研究旨在探讨miR-145是否通过靶向调控GMF[3基因表达而抑制卵巢癌细胞侵袭、转移和增殖能力，从而揭示miR．145抑制肿瘤的分子机制。方法1、追踪文献并运用生物信息学软件Targetscan确定与卵巢癌关系密切的miR一145和靶基因GMF[3。2、RealtimeRT-PCR和Westernblot检测miR．145和GMFl3在侵袭、非侵袭卵巢癌细胞系中表达差异。3、Luciferencereportassay确证靶标

6、作用位点。4、转染miR．145表达载体，RealtimeRT-PCR和Westernblot检测GMF[3基因在mRNA和蛋白质水平变化。5、miR．145的功能分析：过表达miR．145后，采用Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭，CCK．8测定细胞毒性和增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。结果1、GMF]3在卵巢癌中高表达，并随恶性程度正相关，与浆液性卵巢癌患者临床分期相关，miR-145在卵巢癌中低表达，targetScan综合预测GMFl3基因与miR．145有很强的靶作用关系。2、与卵巢癌细胞系CAO

7、V3(非侵袭)比较，GMF[3基因在SKOV3(侵袭)中高表达，相反miR．145低表达。3、Luciferencereportassay证实GMF]3．3’UTR是miR．145的靶作用位点。4、过表达miR．145后GMFl3基因mRNA水平无明显变化，蛋A质水平降低。5、miRNA的功能分析：①Tanswell：过表达miR．145后细胞迁移、侵袭能力减弱。②CCK8：过表达miR．145后细胞增殖能力减弱。③流式细胞术：过表达miR．145后卵巢癌细胞出现凋亡。结论1、miR．145靶作用GMF[3．3’UTR，

8、转录后水平下调其蛋白表达。2、miR．145靶作用GMFl3调节卵巢癌细胞侵袭和转移。关键词，、月K，1卵巢癌；GMFl3；miR．145；侵袭；转移2英文论著摘要miR-145targetsGMFpgeneinovariancancerto●l⋯··●一·‘inhibittumourlnvaslonandmiara