基因诊断教学ppt课件

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1、南方医科大学基因工程研究所基因诊断如何进行产前诊断？家族史：孕妇父母为姨表亲近亲婚配，表型正常，育有男女各一，家族中仅该孕妇为白化病患者，其兄正常白化病：酪氨酸酶缺乏，导致黑色素生成障碍患者32岁，白化病患者，现宫内妊娠19周，2003年11月17日入院。白化病与常规产前诊断思路白化病是一种遗传缺陷，全身性白化病属常染色体隐性遗传方式。局部白化病为常染色体显性遗传，眼白化病（皮肤、毛发均正常）可为Ｘ伴性隐性或常染色体隐性遗传。如果我们把决定酪氨酸酶的基因称为A，则正常人的基因型是AA或Aa，而白化病人的是a

2、a，白化病人没有A基因，就没有酪氨酸酶。白化病遍及全世界，总发病率为1/10000～1/20000。对白化病目前尚无有效的治疗方法，因此应以预防为主。禁止近亲结婚是重要的预防措施之一。对此病也可作产前诊断。在妊娠4～5个月时，通过胎儿镜取胎儿一小块皮肤，在电子显微境下检查胎儿是否为白化病，以避免患儿的出生，达到优生的目的。白化病基因诊断思路基因诊断介绍概述基因诊断的常用方法基因诊断在临床的应用我国基因诊断的发展基因诊断即是指应用现代分子生物学和分子遗传学的方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对人

3、体状态和疾病作出临床诊断或辅助诊断的方法。概　述MoleculardiagnosisGenediagnosisGenetesting一、基因诊断的对象外源DNA：病原生物的侵入内源DNA：先天遗传性疾患后天基因突变引起的疾病其　　它－－－－遗传物质DNA基因诊断适用于INFECTIOUSDISEASESCytomegalovirus(CMV),Epstein-Barrvirus(EBV),HepatitisBvirus,HepatitisCvirus,HIV-1INHERITEDDISEASESBRCA1/

4、2,CysticFibrosis,FactorII,FactorV,FragileXSyndromeONCOLOGY基因诊断的意义：早期检测例如家族性腺瘤息肉基因（APC）常提示与结肠癌的发生密切相关。诊断、分型例如鉴别不同类型的白血病预后例如肿瘤抑制基因p-53的突变常预示着肿瘤有恶性增殖和浸润的倾向。治疗例如利用抗体阻断基因产物，从而抑制肿癌的生长。基因诊断的特点高针对性高特异性高灵敏度适用性强，应用范围广基因诊断技术已经显著地提高了人们的寿命。利用基因诊断技术，人们可以进一步确证诊断结果，并指导医生进

5、行适当的治疗；也可以帮助一些夫妇避免生下有严重疾病的婴儿，或者鉴别一些对疾病具有高危易感的人群。对基因诊断的赞成与反对对成人的Alzheimer'sdisease和一些肿瘤进行的基因诊断的商业化，是对基因诊断争论的焦点。因为这些基因诊断是对健康成人（无症状人群）进行的，鉴别他们是否会因为有某种家族性疾病的背景，从而具有对此疾病的高度易感性。但基因诊断仅仅是给出一个人发展成这种疾病的可能性。基因诊断最大的局限性在于它很难解释阳性结果，因为一些人携带有与疾病相关的基因突变，但并不发病。基因诊断的前景未来10年中

6、，基因诊断将从目前占现代疾病检测中的0.5%扩大到占全部诊断检测的8-10%，创造可观的经济效益。基因诊断的常用方法PCRMolecularhybridizationNucleicacidSequence在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件下，就可以在不同的分子间形成杂化双链。这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸

7、分子杂交。核酸分子杂交(hybridization)DNA-DNA杂交双链分子变性复性不同来源的DNA分子probeprobe核酸分子杂交的应用研究DNA分子中某一种基因的位置测定两种核酸分子间的序列相似性检测某些专一序列在待检样品中存在与否是基因芯片技术的基础探针的种类基因组DNA探针cDNA探针寡核苷酸探针RNA探针理想探针的特征：标记带有示踪物单链核苷酸链高度的序列特异性长度不等以基因编码区设计灵敏度高探针的标记物放射性标记物32P，35S，125I，3H非放射性标记物生物素，地高辛荧光素，酶，金属第

8、1步，生物素和地高辛标记的探针在杂交板中与靶mRNA或者标准mRNA杂交第2步，杂交后的产物转移到链霉亲和素包被的96孔板中，杂交后靶mRNA被捕获第3步，加入AP标记的抗地高辛抗体，然后加入AP底物显色，酶标仪读取结果第4步，绘制mRNA标准曲线，计算标本中靶mRNA的含量探针的标记方法放射性同位素标记法缺口平移法(Nicktranslation)随机引物延伸法(Randomprimerlabelling)末端