川牛膝hplc指纹图谱构建和药材质量评价的研究

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1、手两要川牛膝(Medcmd@口砌zf肠Root)为苋科0maranthaceae)杯苋属(@盘椭“肠Blume)多年生草本植物川牛膝(CyathulaoffZcinalisKuan)的干燥根，为川产道地常用中药材，以四川雅安的天全、宝兴和乐山的金口河区产量最大。近来由于品种的退化和混杂、栽培年限及栽培方法的改变等原因，导致产品质量变异较大，正确评价川牛膝药材质量对指导品种选育与提纯复壮、科学栽培和正确用药均有重要意义，为此本文通过试验研究，建立了一套方便快捷的JII牛膝药材HPLC指纹图谱构建方法，并用其对不同品种类型、不同产地、不同栽培年限、产品不同

2、部位等样品的整体质量进行了评价，结果如下：1．以金口河4年生川牛膝作为供试样品，对不同色谱柱、测定波长、流动相、梯度洗脱程序、柱温、流速等色谱条件进行了比较研究，得出了优化的色谱检测条件：同时比较分析了不同提取溶剂、提取方法和条件等对样品提取效果的影响，得出了样品的最佳提取方法。对试验得出的样品提取方法和优化的色谱条件进行方法学验证的结果表明，各项试验的主要共有峰的保留时间和相对峰面积均无显著变化，RSD均分别小于0．5％与3．9％，系统稳定性和重复性良好，仪器精密度较高。2．从雅安天全县、宝兴县、荥经县、峨眉金舀河区等川牛膝主产区收集了27批不同来源

3、(包含不同栽培地点、品种类型和栽培年限)的川牛膝样品，并从成都大丰药材市场购入4批川牛膝药材和饮片，以上述31个样品为材料，根据优化后的样品提取方法和色谱条件，检测得到了』Il牛膝药材指纹图谱，确定其中lO个共有峰作为指纹图谱的特征组分，并对其中的杯苋甾酮色谱峰进行了鉴别，建立了其共有模式特征指纹图谱。31个样品的色谱峰分离效果好，符合指纹图谱技术有关规定，其全谱与共有模式指纹图谱的相似度较高，在O．791～0．969之间。3．对31个样品的HPLC指纹图谱进行系统聚类，结果表明，川牛膝的品质具有一定的地域性特征，来自同一地区的川牛膝样品大多聚在一群之

4、中。但天全两路乡的6批样品分别聚于3群中，表明其种源混杂严重。4．26个参试样品中，天全三年生大白牛膝T17的品质最高。宝兴一年生大白牛膝T11的品质最低。就杯苋甾酮含量而言，三年生白牛膝以金151河品质最高、宝兴次之、荥经最低；三年生大白牛膝和红牛膝均以天全产最高、宝兴次之、荥经最低；就所有检出成分的总量而言，则三年生白牛膝和大白牛膝均以天全产最高、宝兴第二、荥经最低；三年生红牛膝以荥经最高、宝兴第二、天全最低。5．就所有检出成分的总量的含量而言，宝兴和天全两地均以白牛膝最佳，其次为大白牛膝，红牛膝最差；但如果仅以杯苋甾酮含量作为品质衡量标准，则宝兴

5、产川牛膝以白牛膝最好、红牛膝最差，而天全产川牛膝则以大白牛膝为最佳。6．J11牛-膝根不同部位的质量有差异，从总体上看，两年生牛膝以侧根的杯苋甾酮含量和所有检出成分的总量较高，其次为主根的两端，中部的杯苋甾酮含量略低。三年生川牛膝杯苋甾酮含量以主根下部为最高。7．将不同产地(居群)的种子集中同时种植于天全县两河乡新沟村时，其两年生JIl牛膝中杯苋甾酮含量和所有检出成分的总量均以种子来源为天全紫石乡(居群)和天全县小沟村(居群)的最高；通过比较分析还发现，川牛膝对环境的适应性不强，栽培环境的变化会造成质量的波动。[关键词]』

6、I牛膝高效液相色谱指纹图谱质

7、量评价ABSTRACTMedicinalCyathulaRootisthedryrootofCyathulaoJficinalisKuanPlant，whichisonekindofPerennialherb，Amaranthaceae，CyathulaBlume．CyathulaofficinalisKuanmainlydistributesinSi、chuan，Yun、nanandGui’zhouprovince．Nomatterwildorcultivated，mostofthemaregrowinginthedistrictsabove1500

8、maltitude．AndespeciallytheareasofSi、chuanTian、quan，Bao、xing，Han、yuanandJin’kouheownthemaximunoutput．Recently,asaresultofthedegradationandhybridizationofvarieties，plantinglimit，changesofcultivationmethodsandotherfactors，therearehugeheteromorphosisintheproductqualities．Exactevalua

9、tionoftheCyathulaofficinalisKuanplaysasinifican