骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化的体外实验研究

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1、·192·牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2010，20(4)骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化的体外实验研究董金山，段晴月，文军，金超威，郝靖惠，陆群(1．第四军医大学口腔医学院牙体牙髓科，陕西西安710032；2．广州军区广州总医院口腔科，广东广州510010)[摘要]目的：观察骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化的能力。方法：分离培养sD大鼠骨髓间充质干细胞、胎鼠牙胚细胞，制备牙胚细胞条件培养液；用牙胚细胞条件培养液诱导sD大鼠骨髓间充质干细胞7d，通过免疫荧光染色和RT—PCR方法，观测其表达成牙本质细胞特异性标志物一牙本质涎蛋

2、白(DSP)、牙本质基质蛋白1(DMP一1)的情况，明确骨髓间充质干细胞能否向成牙本质样细胞分化。结果：大鼠骨髓间充质干细胞在诱导体系中生长状态良好。培养7d后，部分细胞抗牙本质涎蛋白(DSP)、抗牙本质基质蛋白1(DMP一1)免疫荧光染色呈阳性；RT—PCR显示mRNA水平表达牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白(DMP一1)。结论：大鼠骨髓间充质干细胞在牙胚细胞条件培养液的诱导下可以分化为成牙本质样细胞。[关键词]骨髓间充质干细胞；牙胚细胞条件培养液；成牙本质样细胞[中图分类号]R780．2[文献标识码]A[文章编号]1005—2593f2010)o4

3、—0192一o4[牙体牙髓牙周病学杂志，2010，20(4)：192]／nvitrostudyontheodontogenicdiferentiationpotentialityofbonemarrowmesenchymalstemcellsDONGJin—shan，DUANQing—yue，WENJun，JINChao-wei，HAOJing-hui，LUQua(SchoolofStomatology，TheFourthMilitaryMedicalUniversity，Xian710032，China)[Abstract]AIM：Toexplorethepo

4、ssibilityofbonemarrowmesenehymalstemceils(BMSCs)diferentia-tingintoodontoblast-likeceils．METHODS：BMSCswereisolatedfromtwo-weekSprague—Dawleyratsandculturedintoothgermcellsconditionedmedium(TGC-CM)．After7dinduction，expressionofdentinsialoprotein(DSP)anddentinmatrixproteinl(DMP1)，andsp

5、ecificmarkersofodontoblasts，wereobservedbyimmunofluoreseeneestainingandRT-PCR．RESULTS：After7daysinductioninTGC-CM，positivestainingofDSPandDMP一1weredetectedinBMSCsbyimmunofluorescencestaining．RT—PCRdemonstratedmRNAexpressionofdentinsialophosphoprotein(DSPP)andDMP一1byBMSCs．CONCLUSION：R

6、atBMSCsinducedbyTGC—CMcoulddifferentiateintoodonto-blast—likecells．[Kwords]toothgermcellconditionedmedium；boneITIalTowmes~ncbymalstemcells；odontogeniediferentiation[ChineseJournalofConservativeDentistry，2010，20(4)：192]多种口腔、全身性疾病均能导致牙齿的缺失，因此，长期以来人们不断致力于寻找一种良好的牙而目前对牙列缺损的治疗仍以义齿和种植为主。齿替代

7、修复手段。进入21世纪后，随着生物医学由于这些传统治疗方法多以损伤邻近组织为基础，的发展，以干细胞为基础的牙齿再生治疗作为一门有别于传统医学的全新治疗手段越来越受到了人收稿日期：2009—12—04；修回日期：2010—03—10们的重视。在牙齿再生研究领域中，种子细胞是其基金项目：国家自然科学基金资助项目(30870636)重要组成部分，主要分为牙源性干细胞和非牙源性作者简介：董金山(1985一)，男，吉林人。硕士生(导师：陆群)干细胞。牙源性干细胞具有良好的成牙潜能，但因通讯作者：陆群，副教授，硕士生导师。Tel：029—84776078其获取困难，一定程度

8、上限制了应用，因此研究非