模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察

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1、第+"卷第!(期第*三*军*医*大*学*学*报d28G+"，L2G!(****!$)%&""’年)月HXPH*HXHC9VIH9*V9CIXILH9*VIBIPHFI:*P9FPIH9:-RG&""’论著文章编号：!"""#$%"%（&""’）!(#!$)%#"%模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察!，&!!!!&刘卫生，王英杰，刘*涛，张世昌**（第三军医大学西南医院全军感染病研究所，重庆%"""+’；延安大学附属医院心血管内科，陕西延安(!,"""）**摘*要：目的*研究模拟微重力条件下小鼠胚胎干细胞（-./01234

2、567-.5-88，9:5）拟胚体（-./0124;/2;4-6，9<6）的,>!形成及分化。方法*胰酶消化普通培养的小鼠胚胎干细胞，调整细胞数为!=!"·.8，移入可模拟微重力的旋转型生物反应器内进行培养，显微镜动态观察鼠9<6的形成，苏木精#伊红染色观察9:5的组织细胞分化情况，检测培养过程中乳酸脱氢酶（8?57?7-;-@1;02A-3?6-，BCD）的漏出量。取不同时相的9<6，接种,孔培养板培养+E$;，倒置相差显微镜观察9<6来源细胞的分化。结果*生物反应器旋转培养&%@即可肉眼观察到大量多细胞聚集体形成，相差显微镜和立

3、体显微镜下发现，(&@后细胞聚集体进一步形成均一的9<6。随培养时间延长9<6体积不断增大，并不断有新的9<6出现。D9染色显示，9<6中的9:5呈现多组织多细胞分化特征，培养后期（!&;以后）较大9<6中心有不同程度的坏死，伴BCD漏出量的明显升高。接种9<6于,孔培养板后，镜下观察到不同类型的细胞，如内皮样细胞、成纤维样细胞、肝细胞样细胞、血管样结构以及可自发性搏动的心肌样细胞。结论*9:5在模拟微重力条件下可大量快速形成9<6，伴有不同类型的组织细胞分化。旋转型生物反应器可作为9:5研究的有用工具。**关键词：胚胎干细胞；拟胚

4、体；分化；生物反应器；微重力**中图法分类号：F+&)#++；F+&)G&!；F++)G$***文献标识码：H!"#$%&’()*%+(+,,*$$#&#+)*()*%+%$’%-.##’/&0%*,/%,*#.-+,#&.*’-1()*+2’*34&%2&(5*)0!，&!!!!BIJK-4#6@-3A，KHLMN43A#O4-，BIJP?2，QDHLM:@4#5@?3A（C-R?07.-372SI3S-5742T6C46-?6-6，:2T7@U-67D26R47?8，&P@40;V4847?01V-;45?8J34W-06471

5、，X@23AY43A%"""+’，C-R?07.-372SX?0;4282A1，P@-HSS484?7-;D26R47?82SN?3’?3J34W-06471，N?3’?3:@?3Z4(!,"""，X@43?）**6/.)&(4)：!"#$%&’($*P267T;17@-S20.?7423?3;;4SS-0-374?74232S.2T6--./0124;/2;4-6（9<6）T3;-064.T8?743A.4502A0?W471G)$&*+,-*V2T6--./01234567-.5-886（9:5-886）U-0-;466254?

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8、2.4502652R-6@2U-;7@?7@2.2A-3-#2T69<6S20.-;S02.7@-6-?AA0-A?74236?S7-0(&#@2T05T87T0-GP@-W28T.-2S9<6A0?;T?8814350-?6-;，?