兔高眼压模型眼co-2c2-激光滤过术的实验研究

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1、天津医科大学硕士学位论文一、兔高眼压模型的建立对象和方法(一)实验动物选用健康成年同本大耳白兔4只(8眼)，雌雄兼用，体重2．2．5kg，由天津医科大学实验动物中心提供。(二)主要试剂和仪器1．0【．糜蛋白酶：上海第一生化药业有限公司，4000U／支2．倍诺喜(0．4％盐酸奥布卡因滴眼液)：日本参天制药株式会社3．便携式喷气式眼压计：Keeler，英国4．手持裂隙灯：HEINE，德国5．双目手术显微镜：Zeiss公司，德国(三)实验方法1．兔高眼压模型的制纠10】于模型制造前用手持裂隙灯观察白兔双眼眼前节，排除

2、眼部疾患。适应性喂养2天，测量记录体重，测量眼压三次，取平均值，并记录。0．25％的乌拉坦4ml／kg体重，耳缘静脉缓慢注射全身麻醉，无菌生理盐水冲洗结膜囊，倍诺喜表面麻醉，开睑器开睑，暴露眼球。lml注射器针头经兔子双眼颞侧角膜缘行前房穿刺，从原针道插入自制的lml注射器钝针头，经瞳孔区进入后房，注入320U／0．25mla．糜蛋白酶0．15．0．20ml，移动针头使药物较均匀的分布于后房。撤针后，用10ml无菌生理盐水冲洗眼表，结膜囊涂典必殊膏。2．眼前节观察及眼压测量模型制造后，典必殊膏点眼7天，观察兔眼

3、前节变化，如结膜、角膜、前房反应等。术后2周内每2．3天测量眼压，2周后每1周测量一次眼压。观测2个月。3．模型制造成功的标准后房注入糜蛋白酶后，眼压持续在25mmHg以上，或眼压增幅在8mmHg以上者，为模型制造成功。(四)统计方法采用SPSS统计软件对数据进行统计处理，高眼压模型制造前后的眼压比3天津医科人学硕七学位论文较采用配对t检验；模型制造后不同时间点眼压之间的比较采用单因素方差分析(one．wayANOVA)。P<0．05被认为有统计学意义。毒士甲：口7卜(一)眼部表现后房注入糜蛋白酶后所有兔眼均出

4、现混合充血，角膜水肿，房水闪辉，虹膜充血(图1、2)。通常术后2．3天，眼压开始升高，眼前节炎症反应持续3．10天后消失。4只兔8眼中有l眼合并晶状体脱位伴巩膜葡萄肿。(二)眼压变化‘注入糜蛋白酶后2．3天，眼压开始升高，术后l周内，兔眼眼压波动较大，随观察时间延长眼压趋于增高，2周后眼压基本稳定。术前平均眼压为10．1+1．05mmHg，术后3、7、14、30、60天的平均眼压分别为15．98+2．91mmHg、21．844-5．18mmHg、23．41+5．02mmHg、23．864-3．97mmHg、25

5、．374-3．16mmHg，与术前眼压相比均有明显的统计学差异，见表l。经单因素方差分析，术后第14、30、60天的眼压之间无统计学差异，F=0．434，P=0．654>0．05。模型成功率为100％。表l高眼压模型眼制各前后眼压比较bo-r-重出吆口互302010037143060时间(天)曲线图l高眼压模型眼眼压升高曲线4天津医科人学硕十学何论文讨论青光眼是一种以视神经损害为特征的致盲性眼病，其发病机制复杂，目前仍未十分明确。但传统观念一直以眼压升高引起的视神经损害作为青光眼的主要发病机制，目前青光眼的治疗

6、也以降眼压为主，因此通过实验方法诱导高眼压动物模型，仍然是对青光眼的病理特点、发病机制和降眼压治疗等方面进行研究的基础。除亚人灵长类动物外，大多数动物的房角都与人类的房角结构有明显差异。从种系发育的角度看，各种动物房角结构的发育进化顺序为：啮齿目(兔、鼠)、蹄爪目(牛、猪)、食肉目(狗、猫)和灵长目(亚人灵长类、人)。虽然许多动物的房角与人类的房角结构形态差异明显，但它们的房水外流途径是和人一样的，都有连续的内皮细胞内衬。因此，人们还是广泛的认可利用这些低等哺乳动物制作高眼压模型，对青光眼进行相关研究。兔作为房

7、角发育较低等的动物，其房水引流系统没有人类的Schlcmm’S管结构，而代之以房水静脉丛[11-12】。而且兔个体适中，便于驯养，用药，观察，眼部除房角结构外，大部分与人类相似，因此被大量选择作为青光眼药物和实验对象。目前，国内外制备实验性高眼压动物模型按高眼压的持续时间长短可分短暂性和持续性两种。短暂性高眼压动物模型，即用人工的方法诱导动物眼出现暂时性眼压大幅升高，主要用于观察青光眼的病理改变，或用于研究降眼压药物的作用机制等。通常这种动物模型的高眼压持续时间少于24小时。报道较多的方法有：前房或玻璃体腔灌注

8、【131、水负荷【¨】、静脉注射高渗溶液㈣及其他药物诱导等。持续性高眼压动物模型的高眼压状态持续时间长，通常在l周以上，主要用于药物、激光或手术治疗青光眼的效果研究方面。其主要诱导方法包括：眼球外部阻碍房水引流，如结扎涡静脉或眼球后的血管，圈套式缝合结扎上巩膜静脉，热烧灼或化学烧灼角膜缘结膜下组织形成瘢痕，硅胶带环扎眼球赤道部等方法；从前房角阻断房水外流，如前房注入空气、棉花、液体硅胶