葛根有效成分的含量测定与提取工艺优化

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1、·52·　　　　　　　　　　　陕　西　农　业　科　学　　　　　　　　　　　　2005(3)a葛根有效成分的含量测定与提取工艺优化彭菊艳,王俊儒,张义英,张普照(西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌　712100)　　葛根为豆科植物野葛[Puerarialobata中,加95%乙醇溶解稀释至刻度,摇匀,即为1mgö[6～7](Wild)Ohwi]的块根,常用生药,味甘辛、性平,ml芦丁标准液。按文献制作标准曲线。具有降低血管阻力,改善心脑血液循环,减慢心2.2.2　样液制备率,降低心肌耗氧量等药理作用。在我国民间,葛(1)热渗滤回流提取法。根也常用于治疗伤寒、温热头痛、

2、烦热消渴等,是分别称取0.500g一年生引种葛根、一年生引中医常用的祛风解毒药。葛根中主要以大豆黄酮种葛茎叶、一年生引种葛根皮、两年生引种葛根、(Daidzein)、大豆黄酮苷(Daidzin)、葛根素两年生引种葛根皮、秦岭葛根、粉葛等的粗粉,用(Puerarin)、4,72二葡萄糖大豆苷、3’2甲氧基葛滤纸包好,置于热渗滤回流提取器中,以95%乙醇根素(3’2methyoxyl2pueraria)、72木糖2葛根素、为溶剂(溶剂量少于10ml)热回流30min,将提取4’,6”2二乙酰基2葛根素、芒柄花素等多种异黄酮液全部转移至10ml具塞刻度试管中,定容至[5]类物

3、质为活性成分,其中以葛根素为主要成分。10ml,摇匀。即为待测液。按标准曲线制作中的方近年来,关于提取纯化葛根总黄酮的方法很法测定黄酮含量。在测定样液中黄酮含量时,以不多,对不同品种的葛根及其不同部位的黄酮含量加10%硝酸铝,作为对照(下同)。作了测定,并对葛根总黄酮的提取工艺进行优化,(2)超声波提取法。选择合适的条件,以便为葛根素的工业化生产提分别称取上述样品各0.200g,置于10ml具塞供新思路。刻度试管中,在超声波清洗器中超声波萃取1　材料与仪器20min,取出后,过滤弃去滤渣,滤液即为待测液。2.3　葛根总黄酮提取工艺优化材料:一年生引种葛根粗粉、两年生引种

4、葛根称取两年生引种葛根干燥粗粉25.000g共16粗粉、秦岭葛根粗粉、粉葛粗粉。份(每一实验号重复1次),按超声波预处理时间、试剂:95%乙醇及其他试剂均为分析纯。提取溶剂(乙醇)浓度、热回流时间为因素,各设2仪器:754型紫外分光光度计;旋转蒸发仪个水平,进行正交试验,探讨各条件对提取效果的(上海亚荣生化仪器厂);KQ3200超声波清洗器影响。实验按表3进行,每一试验号连续浸提3次,(工作频率:40KHz;120W;江苏省昆山市超声波所用溶剂量分别为样品量的5倍、6倍、4倍。提取仪器厂);恒温水浴槽。完成后,抽滤洗涤,合并3次滤液,摇匀,定容至2　实验处理350ml,

5、将提取液浓缩干至恒重,称提取物重量,2.1　材料处理计算提取率。将采集的新鲜葛根清洗去泥,晾干,切片,于3　结果与分析80℃下烘48h至干,粉碎,备用。2.2　葛根黄酮的含量测定3.1　两种方法提取效果的比较按紫外分光光度法测定[6～7]。从两种方法所获得的结果(表1)来看,在各种2.2.1　标准曲线的制作　1mgöml芦丁标准液实验用原料中,热渗滤回流提取法的提取率远大的配制:精确称取芦丁标样50mg于50ml容量瓶于超声波提取法,对一年生引种葛、两年生引种a收稿日期:2005-01-19作者简介:彭菊艳(1979-),女,在读硕士,主要从事药用植物化学成分及相关产品

6、的开发研究。©1995-2005TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.彭菊艳等:葛根有效成分的含量测定与提取工艺优化·53·葛、秦葛、粉葛,前者的提取率比后者分别高出42.流提取法的提取效果很好。06%,60.58%,188.32%,26.15%。表明热渗滤回表1　不同种类的葛根用热回流法与超声波法提取的黄酮含量(单位:gö100g)一年生引种葛两年生引种葛秦岭葛根粉葛热渗滤回流提取法8.45010.47811.5303.184超声波促提法5.9486.5253.9992.5243.2　葛中黄酮的含量分

7、布有效成分在其根中分布较多,在根皮中分布也不多,而在地上部分的茎叶中黄酮含量最少。表2　几种葛不同部位黄酮含量比较(单位:gö100g)3.3　葛根总黄酮提取工艺条件的优化该实验中,考虑了超声预处理时间、溶剂(乙根皮全根茎叶醇)浓度和热回流提取时间三个因素。由结果(见一年生引种葛3.568.451.17两年生引种葛5.5710.48表3)可知,在三个因素中,B>C>A,即溶剂(乙　　注:表中数据为热渗滤回流提取法制得的样液测定结果。醇)浓度对提取率影响较大,其次是热回流时间,最后是超声预处理时间。因此,为了节省时间和试由结果可以看出(见表