nedd4-2clc-2泛素化信号通路在大鼠内侧颞叶癫痫发病机制中的作用

《nedd4-2clc-2泛素化信号通路在大鼠内侧颞叶癫痫发病机制中的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据中图分类号＆Z2UDC鱼!Q硕士学位论文学校代码!Q三三三密级公珏Nedd4．2／CIC．2泛素化信号通路在大鼠内侧颞叶癫痫发病机制中的作用TheeffectofNedd4--2／CIC--2ubiquitinsignalpathwayinthepathogenesisofmedialtemporallobeepilepsyrats作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：杨萍临床医学儿科学中南大学湘雅医院黄榕教授答辩委员会主席塑芝卜中南大学2014年5月万方数据学位论文原创性声明【IIIIIIIIIlllllllIIIIIIlllY2686861本

2、人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：—塑耻嗍：盟年』月耳目学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学

3、校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：年醐：世年』月卑日鼻，导师签名丝日期：趔2年且丑日万方数据本研究受以下项目资助国家自然科学基金青年基金项目：Nedd4．2／C1C．2泛素化信号通路在内侧颞叶癫痫发病机制中的作用。编号：81100846万方数据Nedd4．2／CIC-2泛素化信号通路在大鼠内侧颞叶癫痫发病机制中的作用摘要目的：研究内侧颞叶癫痫(mesialtemporallobeepilepsy,mTLE)大鼠模型以及阻断泛素一蛋白酶体系统(ubiquitin-

4、proteasomesystem，ups)后各个时期海马组织的病理学改变，分析泛素(Ubiquitin，Ub)、Nedd4—2、C1C一2的表达变化，探讨Nedd4．2／CIC．2泛素化信号通路在mTLE发病机制中的作用。方法：25日龄SD大鼠75只(清洁级)，随机分为3组，对照组、模型组、MG．132(蛋白酶体抑SRJ完：U)预处理组。模型组及预处理组大鼠分别予以相应药物(匹罗卡品、氯化锂、MG一132等)腹腔注射进行造模，诱导出现癫痫持续状态(Statusepilepticus，SE)，对照组用等量生理盐水代替。造模成功后，根据SE后获取标本的时间不同将各组分别随机分

5、为3个亚组，即急性期组、潜伏期组、慢性期组。(1)对照组、模型组的各亚组：应用免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation，Co-Ip)技术、免疫荧光双标结合激光共聚焦技术分析大鼠海马中Ub与Nedd4．2是否存在相关性；(2)对照组、模型组、MG．132预处理组的各亚组：对各组大鼠模型进行行为学观察；对各组大鼠脑组织切片行HE染色、尼氏染色，观察各组神经元的丢失，Timm染色观察苔藓纤维出芽(Mossfibersprouting，MFS)；采用Westernblot技术检测各组大鼠海马中Ub、Nedd4—2、C1C．2的表达水平。结果：对照组大鼠行为学及组织

6、病理学均无改变。氯化锂一匹罗1T万方数据卡品腹腔注射造模成功率为90．O％，死亡率为24．1％，有73．7％的大鼠在8周后出现慢性自发发作。模型组大鼠海马神经元丢失明显，可见MFS，MG．132预处理组病理改变较模型组更为明显，两组间比较差异有统计学意义(P<0．05)。Co．IP及免疫荧光双标结合激光共聚焦技术证明Ub与Nedd4．2是有相互关系的蛋白。Westernbolt检测模型组和MG．132预处理组Ub、Nedd4．2、CIC．2表达均存在变化。Ub结果：模型组与对照组比较表达无明显变化；MG．132预处理组与对照组及模型组比较，急性期及潜伏期中表达上升，慢性期

7、中表达下降愀0．05)；Nedd4．2结果：模型组与对照组比较，急性期及潜伏期中表达下降，慢性期中表达上升(P<0．05)；MG．132预处理与对照组比较，三个时期表达均下降(P<0．05)，与模型组比较，在急性期、慢性期表达下降，潜伏期表达上升(P<0．05)；CIC。2结果：模型组和对照组的比较与Nedd4．2一致；MG．132预处理组与对照组比较，在急性期及慢性期表达降低，在潜伏期升高(P<0．05)，与模型组的比较与Ub相同。结论：(1)在正常及mTLE大鼠模型的海马中均存在Ub介导的信号通路，Nedd4．2是这一途径