il-6对bv2小胶质细胞系铁代谢相关蛋白的影响及其调控机制研究

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1、IL一6对BY2小胶质细胞系铁代谢相关蛋白的影响及其调控机制研究摘要帕金森病(Parkinson’Sdisease，PD)以静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势反射障碍为主要症状。病理上表现为中脑黑质致密带(substantianigraparscompact，SNpc)中多巴胺(dopamine，DA)能神经元丢失，进而导致纹状体中DA含量下降。在可能引起PD发病的原因中，神经炎症越来越引起人们的关注。PD患者黑质(substantianigra，SN)中出现小胶质细胞的激活，脑脊液中肿瘤坏死因子．Q(tumornecrosisfactor，TNF．Q)、白细

2、胞介素lB(interleukin．1B，IL．1B)和白细胞介素6(interleukin．6，IL．6)含量出现了上升。卜甲基．4一苯基．1，2，3，6．四氢吡啶(J-methyl-4一phenyl-l，2，3，6-tetrahydropyridine,MPTP)、6一羟基多巴胺(6一hydroxydopamine，6-OHDA)、鱼藤酮、annonacin都能引起PD动物模型SN区中小胶质细胞的激活。PD患者SN中炎症发生时，激活的小胶质细胞中铁含量异常升高，并且激活的小胶质细胞可以影响到SNpc铁的聚集，此外本实验室前期己证明TNF．Q、IL．1B可以

3、影响神经元的铁代谢。那么小胶质细胞释放的IL．6是否会影响其自身铁代谢的变化?本实验应用细胞培养、M1vr、荧光定量PCR、免疫印迹等多项研究技术，观察了铁对BV2小胶质细胞释放的IL．6的影响以及IL．6对BV2小胶质细、胞铁代谢的影响。结果如下：1．100lamol／L枸橼酸铁铵(ferricammoniumcitrate，FAC)处理BV2细胞12h后，BV2细胞中IL．6mRNA上调了30％，与对照组相比，差别有统计学意义(P<0．05，n=6)。2．选用30ng／ml、50ng／ml、100ng／mlIL-6处理BV2细胞24h，结果显示各组活性与对

4、照组相比细胞的存活率没有变化(P>0．05，n-4)。30ng／ml被选为后继实验中所应用浓度。3．30ng／mlIL一6处理BV2细胞24h，BV2细胞中铁调节蛋白1(ironregulatoryproteinl，IRPI)的蛋白表达水平上调，与对照组相比，差别有统计学意义(P

5、蛋白激酶类(c．JunN．terminalkinase，JNK)水平显著增加(P0．05，n=4)。10umol／L被选为后继实验中所应用浓度。7．预先用10lamol／LJNK特异型抑制剂SP600125处理BV2细胞lh后，加入30ng／mlIL．6继续作用24h，可以抑制由IL．6引起的IRPI蛋白表达水平上调，与IL．6处理组相比差别有显著性(P

6、剂SP600125处理BV2细胞lh后加入30ng／mlIL．6继续作用24h，可以抑制由IL．6引起的FPNI蛋白表达水平下调，与IL．6处理组相比有统计意义(P<0．05，n=4)。上述结果表明，FAC可增加BV2小胶质细胞IL．6mRNA的表达。IL．6可以使BV2小胶质细胞IRPl表达增加，FPNl表达降低。JNK抑制剂SP600125预处理可以阻断IL．6所引起的IRPI与FPNl蛋白的表达变化。本实验证实高铁环境下，BV2小胶质细胞合成IL．6增多，而IL．6可以调控BV2小胶质细胞铁代谢相关蛋白，该过程是通过JNK信号途径实现的。本研究为PD炎症

7、发生与铁代谢异常的相互作用提供了强有力的实验基础与理论依据，并为PD的临床抗炎治疗提供了更加详实的实验基础。硕士研究生：周仕达(神经生物学)指导教师：王俊副教授谢俊霞教授关键词：小胶质细胞；白细胞介素6；铁调节蛋白1；ferroportin1；删【Theregulationofinterleukin6OHironmetabolismrelatedproteinsinBV2microglialcelllinesAbstractParkinson’Sdisease(PD)isacommonneurodegeneratiVedisordercharacterized

8、byrestingtremor,rig