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时间:2019-02-24
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1、郑州大学硕士学位论文FCM检测低能N<'+>注入对活性污泥微生物菌群的影响姓名:朱海霞申请学位级别:硕士专业:生物物理学指导教师:陈林海20070520郑州大学硕七学位论文FCM检测低能N+注入对活性污泥微生物菌群的影响摘要活性污泥是生物处理污水系统的功能主体,其生物活性的高低主要取决于微生物菌群结构和功能。由于活性污泥中的微生物大部分处于活的但不可培养(Viablebutnonculturable,VBNC)状态,传统培养方法仅能检测活性污泥中微生物数量的l-15%。本试验利用荧光原位杂交技术(Fluorescentinsituhyb
2、ridization,FISH)和流式细胞术(Flowcytometry,FCM)对低能N+注入活性污泥微生物菌群的影响进行了原位检测研究。基于16SrRNA,设计了活性污泥中主要细菌类群ix-、p.、丫.变形杆菌(proteobacteria)亚纲、CF(Cytopbaga-Flexibacterium)类群、HGC(gram-positivewithhighG+CDNAcontent)类群的特异探针,利用流式细胞术对原活性污泥样品中各细菌类群进行检测,结果显示,优势菌群是变形杆菌类群,相对丰度为58.3%,其中甜、13.、卜变形杆菌
3、亚纲分别为17.8%、19.8%、20.7%,其次是CF类群(21.6%),HGC类群(19.9%)。流式细胞术检测低能盯注入后活性污泥中菌群变化的结果显示:较低剂量(5x10”N+/cm2)注入时,活性污泥微生物菌群的结构变化不大;较高剂量注入时活性污泥微生物菌群的结构变化较大,其中,1x1015N+/cm2注入剂量下Y.变形杆菌亚纲类群的细菌相对含量增加较多,5x1015N+/cm2注入剂量下a.变形杆菌亚纲类群的细菌相对含量增加较多。较高剂量注入下活性污泥菌群的结构变化较大是不同微生物菌群对低能N+注入敏感性差异的直接反映,这提示
4、我们在活性污泥的菌群诱变工作中采用多剂量诱变的策略有可能拓宽变异谱。关键词:活性污泥,微生物菌群,荧光原位杂交,流式细胞术,低能离子束郑州大学硕士学位论文FCM检测低能N+注入对活性污泥微生物菌群的影响AbstractActivatedsludgeisthekeyfunctionalelementofbiologicalwastewatertreatmentplantswhichemployallactivatedsludgeprocess,anditsbiologicalactivitydependslargelyonthemicro
5、bialcommunityofactivatedsludge.Buttraditionalcultivation—basedstudiescoulddetectonlyl%to15%ofmicroorganisminactivatedsludge,sincethemajorityofmicroorganismsintheenvironmentareviablebutnonculturablestate.Therefore,itisimportanttoapplythemethodsofcultivated·independentmole
6、cularbiologytoresearchactivatedsludgemicrobialcommunity.ThebactericalcommunitystructuresinactivatedsludgeweTeanalyzedbyacombinationoffluorescentinsituhybridization、析mflowcytometry.Thebactericalcommunitystructuresofactivatedsludgesamplefromaaerationbasinwereanalyzed、Ⅳimol
7、igonucleotideprobesspecificforthealpha,bcta,orgammasubclassesofProteobacteria,fortheCytophaga—Flexibaeteriumgroup,forgram—positivewithhighG+CDNAcontent.TheshowsthatthedominantbacterialcommunityWasProteobacteria、jvitIIarelativeabundanceof58.3%.respectivelyU-、p·、7-Proteoba
8、cteriawere17.8%、19.8%、20.7%;CFgroupWas21.6%;HGCgroupWas19,9%.TogiveUSausefulreferenceforimprovingtheact
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