cytophaga hutchinsonii纤维素降解相关基因的鉴定与功能研究

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1、分类号：Q93密级：单位代码：10422学号：201564厶篓夕；孥SHANDONGUNIVERSITY硕士学位论文ThesisforMasterDegree论文题目：Cytophagahutchinsonii纤维素降解相关基因的鉴定与功能研究直^【1吖J日LWl／LIdentificationandfunctionalanalysisofgenesinvolvedinCelluloseUtilizationinCytophagahutchinsonii作者姓名培养单位专业名称指导教师合作导师步绪亮生命科学学院微生物学刘巍峰教授陈

2、冠军教授2014年5月26日原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：查缢丝日期：兰!!=：!望关于学位论文使用授权的声明本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩

3、印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定论文作者签名：—尹缸建么导师签名：日期：叫继习山东大学硕士论文目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IABSTRACT．⋯．⋯．⋯⋯．⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．．⋯．⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．．⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯III缩略词表(ABBREⅥATIoN)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅵ第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．1纤维素的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11．2纤维素生物降解的策略⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31．2．1游离纤维素酶协同降解机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31．2．2纤维小体降解机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一41．2．3第三种纤维素降解机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51．3细菌的滑动⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．71．3．1黄色粘球菌(Myxococcusxanthus)的滑动⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一81．3．2约氏黄杆菌(Flavobacterhtmjohnsoni

5、ae)的滑动⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．4Cytophagahutchinsonii的特征及研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1O1．4．1Cytophagahutchinsonii的特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．101．4．2Cytophagahutchinsonii的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一111．5论文的立题依据及工作内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14第二章Cytophagahutchinsonii纤维素利用缺陷突变株MTl．5的筛选与鉴定．．152．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1．1菌株与质粒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1．2引物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1．3培养基⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．1．4主要试剂及仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17山东大学硕士论文2．1．5常规分子生物学方法及反应体系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．1．6接合转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．1．7电转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．182．1．8纤维素利用缺陷菌株的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．1．9MTl．5的转座子插入位置的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．192．1．10MTl．5的Southernblot验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．1．11Sppl的RT．PCR以及sppl的插入是否引起极性效应的验证⋯⋯⋯．202．1．12chu2981的序列分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．202．2结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l2．2

8、．1Cytophagahutchinsonii转化方法的确定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．212．2．2纤维素利用缺陷菌株的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222．2．3纤维素利用缺陷菌株MTl．5的转座子插入位置的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．2．4