bmscs联合促红细胞生成素治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

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1、万方数据中图分类号隧墨!：5垒UDC互!Q硕士学位论文学校代码!Q5三三密级公珏BMSCs联合促红细胞生成素治疗大鼠脊髓损伤的实验研究Experimentalstuayonthetreatmentofspinalcordinjuryinratswithbonemarrowmesenchymalstemcellstransplantationcombinedwitherythropoietin作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：曾智谋临床医学外科学(骨科)中南大学湘雅医学院附属海口医院张寿教授

2、论文答辩日期坦f笙：』：望答辩委员会主席中南大学二零一四年五月万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担～切相关责任。作者签名：日期：塑!臣年j二月血巳日学位论文版权使用授权书本学位论文作者

3、和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：盥导师签名：日期：趔《年上月笪日日期：_2／盟年上月监日万方数据BMSCs联合促红细胞生成素治疗大鼠脊髓损伤的实验研究摘要：目的：构建稳定的SD大鼠脊髓损伤模型，探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合促红细胞生成素

4、(EPO)对其修复的作用机制。方法：1．采用全骨髓培养法获取BMSCs，利用流式细胞仪检测P2、P3代细胞表型以鉴定细胞。2．采用HatterasInstrumentsPCI3000精密打击器，设置打击参数，建立TIO节段的SD大鼠脊髓损伤模型。3．120只sD雄性大鼠完全随机分为四组，每组30只，A组为损伤对照组，B组为EPO治疗组，C组为BMSCs治疗组，D组为BMSCs联合EPO治疗组。术后l、3、7、14、28天每组分别取6只大鼠，采用BBB评分评价双后肢运动功能后进行组织学检测，观察细胞凋亡率和NF-

5、200的表达量，其中C组和D组还检测BrdU标记的BMSCs在损伤区的阳性率。采用软件SPSSl9．0对实验数据进行统计分析。结果：1．BMSCs经全骨髓法培养3代以内均具有典型成纤维样细胞形态而且贴壁生长；细胞表型(CD29、CD90、CD34、CD45)阳性率检测结果：P2代分别为91_5％、96．2％、1．3％、8．O％；P3代分别为98．2％、98．1％、0．6％、2．0％。2．细胞生长曲线结果表明，以浓度8x104／ml接种，细胞增殖速度快，获得的细胞总数多。3．BBB运动功能评分结果，术后7、14、

6、28天，B、C、D组明显高于A组，差异有统计学意义(尺0．05)；D组明显高于B、C组，差异有统计学意义(尺0．05)。4．细胞凋亡指数结果，术后1天损伤区细胞明显凋亡，3天达到高峰，TI万方数据以后逐渐下降，各时间段内组间比较均为：A>B>C>D，差异有统计学意义(J日<0．05)。5．NF-200表达水平术后迅速下降，3天下降水平达到高峰，以后表达逐渐升高，各时间段内组间比较均为：A

7、意义(只O．05)。结论：1．第3代大鼠骨髓间充质干细胞可作为脊髓损伤移植的种子细胞；2．HatterasInstrumentsPCI3000精密打击器可建立大鼠脊髓损伤模型；3．大鼠骨髓间充质干细胞和促红细胞生成素可通过减少细胞凋亡、促进神经蛋白表达对损伤组织起保护和修复作用，提高疗效。图65幅，表5个，参考文献66篇。关键词：骨锈间充质干细胞；促红细胞生成素；脊髓损伤分类号：610m万方数据Experimentalstudyonthetreatmentofspinalcordinjuryinratswith

8、bonemarrowmesenchymalstemcellstransplantationcombinedwitherythropoietinAbstract：Objective：ThestudyaimstoestablishthesteadyandeasilyreplicatedmodelsofspinalcordmjuryinSDrats，andtoinvestigatetheef