bfgf调控下高糖抑制成纤维细胞迁移机制研究

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1、万方数据答辩委员会主席：鱼整!聋缝答辩委员会成员：一盔堑垒丛鳖盈董：显燮垒鱼奎!鲢塑堑论文答辩日期：兰鱼!生：竺圭!!』万方数据黥嬲缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1bFGF调控下高糖抑制成纤维细胞迁移机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2TheMechanismsofHigh-glucoseInhibitsHumanFibroblastCellMigrationregulatedbybasicfibroblastgrowthfactor⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．4Abstract⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7bFGF调控下高糖抑制成纤维细胞迁移机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9抗体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．10主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11主要溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．13结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33正文参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．40万方数据温州医科大学硕士学位论文综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5

4、4万方数据温州医科大学硕士学位论文缩略词表缩略语英文全称中文注释bFGFbasicFibroblastGrowthFactorJNKJunN．terminalkinaseDMdiabetesmellitusFGFRfibroblastgrowthficmrreceptorDMEMDulbecco’SModifiedEagleMediumFBSFetalbovineserumPBSPhosphatedufferedsalutionDMSODimethylsulfoxideEDTAEthyleneDiamineTetraaceticAcidBSABul

5、lSerumAlbuminPVDFPolyvinylidenefluoridePAGEPolyacrylamidegelelectrophoresisTEMEDTetramethylethylenediamineAPSAmmoniunlpersulfateSDSSodiumdodecylsulfate"IrisTrisbaseDTTDithiothreitolAktProteinkinaseBLC／MSliquidchromatograph-massspectrometerROSreactiveoxygenspeciesRNSReactiveNit

6、rogenSpecies碱性成纤维细胞生长因子c-Jun氨基末端激酶糖尿病成纤维生长因子受体Dulbecco改良的Eagle培养基胎牛血清磷酸盐缓冲液二甲基亚砜乙二胺四乙酸牛血清白蛋白聚偏二氟乙烯膜聚丙烯酰胺凝胶电泳四甲基乙二胺过硫酸铵十二烷基硫酸钠三羟甲基氨基甲烷二硫苏糖醇蛋白激酶B液相色谱联用质谱活性氧自由基活性氮自由基3-NT3-nitrotyrosine3一硝基酪氨酸1万方数据温州医科大学硕士学位论文bFGF调控下高糖抑制成纤维细胞迁移机制研究中文摘要目的1．观察高糖对成纤维细胞增殖及细胞凋亡和炎症的影响；2．验证bFGF对高糖抑制的成纤维

7、细胞增殖及高糖诱导的凋亡炎症保护作用：3．验证高糖损抑制成纤维细胞迁移是否通过抑制bFGF调控的JNK信号：4．鉴定bFGF保护高糖损伤的细胞是否通过抵制特殊蛋白的硝基化修饰；方法1．设置不同浓度血清的不同浓度高糖培养基，添加不同浓度bFGF作用不同时间，用CCK．8检测细胞增殖情况，用wester-blot检测细胞内凋亡炎症蛋白表达情况；2．使用FGFRI抑制剂PDl73074抑制bFGF信号，用细胞刮痕迁移实验检测bFGF和高糖对细胞迁移的影响，用wester-blot检测细胞内凋亡炎症蛋白表达及bFGF调节的关键蛋白ⅢK和AKT的表达：3．用

8、激活的Racl检测试剂盒检测高糖及bFGF对细胞内激活的Racl的表达；4．用MDA检测试剂盒、ROS检测试剂盒和west