99tcm标记egfr小分子靶向结合蛋白显像的实验研究

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2、他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：嚏立碣导师签章影愁恻、／1咖怍弓月岁J日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9研究论文99Tcm标记EGFR小分子靶向结合蛋白显像的实验研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10日lJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lU材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33综述表皮生长因子受体分子显像的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯54中文摘要∞Tcm标记EGFR小分子靶向结合蛋白显像的实验研究摘要目的：制备99Tcm标记的表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)小分子靶向结合蛋白ZEGFR．1907分子探针，评价其体内外稳定性，分析该分子探针与细胞EGFR的体外靶向结合能力，研究分子探针在不同EGFR表达水平荷瘤裸鼠体内分布和体内显像，并进行相应对比分析，探讨其对EGFR高表达肿瘤早期、特异性诊断的可行性。方法：采用Fmoc／tBu多肽固相合成法合成zEGFR．19

5、07，于其N末端连接4个氨基酸[Gly．(D)Ala．Gly．Gly．】作为螯合剂，其可形成类似N4结构的强螯合基团，为了消除其分子基团间的空间阻碍，引入1个Y．氨基丁酸(4．aminobutyricacid，Aba)作为隔离物，得到化学结构为Gly．(D)Ala．Gly．Gly．Aba．ZEGFR：1907的小分子靶向结合蛋白，再应用配体交换法进行核素99Tcm标记，最终制备形成99Tcm标记的EGFR小分子靶向结合蛋白ZEGFR．1907分子探针(简写为99Tcm．ZEGFR．1907)。采用反相高效液相色谱法(rev

6、erse．phasehighperformanceliquidchromatography，RP—HPLC)测定其不同时间点的标记率及在生理盐水与人新鲜血清两种介质中37℃条件下孵育不同时间后的放化纯，以监测其体外稳定性。采用静置贴壁法在37。C恒温培养箱内培养EGFR高表达的人卵巢癌SKOV3细胞与EGFR低表达的人乳腺癌MDA．MB．435S细胞，取对数生长期的人卵巢癌SKOV3细胞用RPMI1640(RoswellParkMemorialInstitute1640)培养液制成单细胞悬液，注射于每只BABL／c裸鼠的右

7、前肢外侧皮下，每只裸鼠注射0．2ml，约l×107个细胞，SPF级(specificpathogenfree，无特定病原体)环境下饲养，约4"--5周肿瘤长至直径约1～1．5cm时，即建成EGFR高表达的人卵巢癌SKOV3细胞荷瘤裸鼠模型。此外，用同样的方法建立EGFR低表达的人乳腺癌MDA—MB一435S细胞荷瘤裸鼠模型。用RP．HPLC法测定SKOV3荷瘤裸鼠体内注射99Tcm．ZEGFR．1907分子探针后2．3h内尿液中该分子探针的放化纯，监测其体内稳定性。进行EGFR高表达的人卵巢癌SKOV3与EGFR低表达的人

8、乳腺癌MDA．MB．435S细胞两种肿瘤细胞对99Tcm．zEGFR．1907的体外摄取和滞留实验，分析EGFR与99Tcm．zEGFR：1907中文摘要的体外靶向结合能力。另外，阻断实验中，在向SKOV3细胞中加入99Tcm．ZEGFR．1907前20min先加入过量的未标记的ZEGFR：1907进行