鲍曼不动杆菌耐药基因的检测及同源性分析

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1、贵阳医学院2012届硕士研究生论文《中国图书资料分类法》分类号：R378单位代码：10660学号：S090082贵阳医学院2012届硕士学位论文鲍曼不动杆菌耐药基因的检测及同源性分析研究生：肖慈然导师：莫非教授李智山主任技师年级：2009级专业：临床检验诊断学2012年5月20日1贵阳医学院2012届硕士研究生论文目录摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„5材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„7结果„„„„„„„„„„„„„„

2、„„„„„„„„„„14讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„22参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„27英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„31致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„33略缩词表„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„34论文原创性声明„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„35附：综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„362贵阳医学院2012届硕士研究生论文鲍曼不动杆菌耐药基因的检测及同源性分析专业：临床检验诊断

3、学姓名：肖慈然导师：莫非教授李智山主任技师摘要目的：通过分析襄阳市中心医院鲍曼不动杆菌（Acinetobacterbaumannii,Ab）的耐药情况，耐药基因的检测及流行趋势分析，为临床合理用药提供参考，并为减少耐药菌株的流行及传播奠定基础。方法：收集2010年8月至2011年7月我院临床分离的非同一患者的Ab，采用纸片扩散法（K-B法）进行药敏试验，以美国临床实验室标准委员会（CLSI）2011年版为判断标准,药敏结果使用WHO提供的WHONET5.4软件进行统计分析；应用聚合式酶链反应（PCR）对22株泛

4、耐药鲍曼不动杆菌（Pandrugresistance,PDR-Ab）的OXA-23、OXA-24、OXA-58、TEM、SHV、CTX-M、PER、DHA、IMP、VIM、SIM、AAC(3)-Ia、AAC(3)-IIa、AAC(6)-Ih、AAC(6)-Ib、Int-1、Int-2、adeA、adeB、adeC、adeR、adeS耐药基因进行检测，并通过双脱氧末端终止法对PER阳性基因进行测序；采用肠杆菌科间基因重复序列（ERIC）-PCR与脉冲场凝胶电泳（PFGE）对22株PDR-Ab进行同源性分析。结果：

5、2010年8月至2011年7月我院临床分离的223株Ab来源于呼吸道、脓液、穿刺液等标本，其中呼吸道标本检出率为70.9%。223株Ab对各类药物呈现不同的耐药率，其中复方新诺明的耐药率最高，79.8%，头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低，17.5%，并检出22株泛耐药菌。22株PDR-Ab对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦耐药率分别为50%,40.9%，31.8%，其余抗菌药的耐药率均为100%。PCR扩增结果显示，22株PDR-Ab携带基因分别为：OXA-23基因22株、TEM基因16株、PER基因4株、IMP

6、基因12株。全部携带AAC(6)-Ib基因，有19株菌含有AAC（3）-Ia基因。主动外排表型检测显示14株为阳性菌株，并检测出主动外排的相关的adeR基因15株及20株adeS基因。PFGE聚类分析结果显示22株PDR-Ab分为A（15株）、B（7株）两个类型。ERIC-PCR技术将22株PDR-Ab分为5个基因型，其中以b型（9株）最多。结论：1.本院鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药率较高，泛耐药率高达9.9%。3贵阳医学院2012届硕士研究生论文2.我院的Ab携带的耐药基因主要是OXA-23群基因、AAC(

7、6)-Ib基因。3.我院中心ICU在2010年8月至2011年7月期间存在PDR-Ab的流行菌株。关键词:鲍曼不动杆菌耐药基因同源性泛耐药4贵阳医学院2012届硕士研究生论文前言鲍曼不动杆菌（Acinetobacterbaumannii,Ab）是一种非发酵的、氧化酶与动力均为阴性的革兰阴性球杆菌，广泛分布于人体表面及医院环境中。Ab作为机会致病菌，可在机体免疫力下降或功能受损时引发严重感染，如败血症、呼吸相关性肺炎(VAP)、脑膜炎、泌尿系统感染等，尤其以ICU、神经外科等病房多见，因此成为院内感染的重要致病菌

8、之一。近年来，随着广谱抗生素的大量使用，Ab对临床常用抗生素的耐药性也越来越严重。CHINET细菌耐药性监测显示，2007年至2010年Ab对亚胺培南的耐药率依次为：39.4%、48.1%、54.8%、57.1%,对美诺培南的耐药率依次为：44.5%、49.3%、57.2%、58.3%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率依次为5.8%、14.6%、26.3%、30.7%。多重耐药（Mutidr