白藜芦醇对人卵巢癌skov-3细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

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1、徐州医学院硕士学位论文白藜芦醇对人卵巢癌SKOV--3细胞增殖与凋亡的影响及机制研究姓名：李攀申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：陆晓媛2012-03徐州医学院硕士学位论文白藜芦醇对人卵巢癌SKoV．3细胞增殖与凋亡的影响及机制研究中文摘要目的通过观察白藜芦醇对体外培养的人卵巢癌SKOv．3细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用，初步探讨白藜芦醇抑制卵巢癌细胞生长的可能机制，为白藜芦醇临床治疗卵巢癌提供实验和理论依据。方法人卵巢癌细胞株SKOV．3细胞常规培养于含10％胎牛血清、looU／ml青霉素和100p咖l链霉素的RPMll640培养液中，在37℃、5％C02及饱和湿度培养

2、箱中培养。实验分两组，即实验组(加入10岬。儿、20岬。儿、40岬。儿及80岬。儿白藜芦醇)和对照组(未加入白藜芦醇)。MTT法检测不同浓度白藜芦醇处理SKOV．3细胞24h、48h和72h后，对SKOV-3细胞增殖的影响；A[1IlexinV-FITC／PI双染检测不同浓度白藜芦醇处理SK0v-3细胞48h后的凋亡率；RT．PCR和Westemblot法测定白藜芦醇处理SKOv-3细胞48h后VEGF基因转录和蛋白的表达变化。结果MTT结果显示不同浓度的白藜芦醇作用于SKOV-3细胞不同时间后，细胞增殖受到显著抑制，与对照组相比差异有统计学意义p

3、浓度组在24h后出现抑制作用，随着白藜芦醇浓度的增大其抑制效果明显增强，呈浓度时间依赖关系p=0．765，P<0．01；，=0．528，尸<0．01)。FCM检测结果显示不同浓度白藜芦醇处理SKOV-3细胞后能诱导其凋亡，80岬ol／L浓度组凋亡率为50．37±1．05％，与对照组比较差异有统计学意义(尸<0．05)。RT．PCR检测结果显示白藜芦醇作用SKOV-3细胞48h后VEGFmRNA表达显著下调∽<0．05)。Westemblot检测结果显示白藜芦醇作用SKOV-3细胞48h后，VEGF蛋白表达显著下调俨

4、制体外培养的人卵巢癌SKOV-3细胞增殖，该抑制作用具有浓度时间依赖性。2．白藜芦醇能诱导体外培养的人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡。3．白藜芦醇对SKOV-3细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与下调VEGF水平有关。关键词白藜芦醇；VEGF；卵巢癌；增殖；凋亡徐州医学院硕士学位论文ThestudyOfmechanismandtheefIfectsofresVeratrolonthe●●●●』●1●■DronIeratlonannaDODt0SlSlnnUman0variancarcinmaceUlineSKOV二3AbstractObjectiveTostlldytllemech

5、anismandefrectsofresVeratrolontheproliferation锄dapoptosisiIlhumanoV撕a11carcinmacelllineSKOV-3inVi仃o，a11dtoproVideexperiment址锄dn伧oreticalb嬲isfort11eclinic2L1讹a恤emofresVeratr01tooV撕anCanCer．MethodsHmnanovariancarcinomaceUlineSKOV．3cellswass矗al-subcultiVatedintheRPMI1640culturenuidinCluding1O断

6、CS，1ooU／mlpellicillinaIld100嵋／mls骶ptomycinintheinCubatordema∞ding37℃、5％C02andsatu】献edhumidi够Experimentation、vasdiVidedintot、vo伊oups，namelytheexpe血lentalgroup(adding10“mol／L，20肛m01／L，40岬01／La11d80pmol／Lresveratr01)aIldcon勺∞lgroup(withoutaddedresVeratr01)．ProliferationofSKOV-3cells、vithdiffer

7、entconcentrationsofresVeratrolfor24h，48hand72hwasdetectedbyMTTtestaIldthe印optosisrateofSKOv．3cellswithdifferentconcen仃ationsofresVera仃olfor48h、^，a暇analyzedbyA衄exinV·FITCandPIdoublestailling．TheexpressionleVersofVEGFmI矾AandproteinaRerresveratrol仃eatingSKO