抗凋亡药品在猪精液冷冻保存中的应用

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1、分类号UDCS814．3硕士学位论文抗凋亡药品在猪精液冷冻保存中的应用杨宝卫研究方向塞查鲤剖量组织胚脸堂指导教师塑佳活副数援论文答辩日期2012．5．22学位授予日期2012．07答辩委员会主席梁明握数援论文评阅人昱挂旦婴宜员黄明迸直级查塑』!巫广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论

2、文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。团不保密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名：扔蛔指导教师签名：诵／2咎．汐作者联系电话：13407703467日期：w)上6．上叶日期：矽／≯．莎。沽．电子邮箱：9958

3、8166@qq．com抗凋亡药品在猪精液冷冻保存中的应用f㈣燃摘要为了进一步提高猪冷冻精液解冻后的品质，为抗凋亡试剂在猪精液冷冻中的应用提供参考数据，本研究采用手握法采集成年种公猪精液，预处理后用添加不同剂量褪黑素(O、l、5、lOmmol／L)、盐酸多巴胺(0、0．1、1、lOmmol／L)、盐酸川穹嗪(0、0．08、0．1、0．12retool／L)、葛根素(0、0．1、0．01、0．001mmol／L)、二氯乙酸钠(O、l、0．1、0．Olmmol／L)、酒石酸美托洛尔(O、1、0．1、0．Olmmol／L)等抗凋亡药品的稀释液稀释，经冷冻一解冻

4、后采用考马斯亮蓝对精子进行染色，然后在显微镜下检查精子畸形率和顶体完整率。结果表明：(1)冷冻稀释液中添加三种浓度的褪黑素，仅lOmmol／L褪黑素能显著改善冻后猪精子的畸形率和顶体完整率。(2)在本试验条件下，冷冻稀释液中添加一定量的盐酸多巴胺，能显著降低猪精子的畸形率和提高顶体完整率。从经济实惠以及批量生产角度来看，盐酸多巴胺浓度以0．1mmol／L最好。(3)在猪精液冷冻保存时添加不同浓度的盐酸川穹嗪均能显著降低冷冻后精子的畸形率和提高精子的顶体完整率，其中O．12mmol／L盐酸川穹嗪效果最好。(4)冷冻稀释液中添加一定量的葛根素，不能显著降低

5、猪精子的畸形率，也不能显著提高冻后精子的顶体完整率。(5)在冷冻稀释液中添加二氯乙酸钠对冻后精子畸形率和顶体完整率没有改善作用。(6)添加酒石酸美托洛尔对冻后猪精液质量没有显著影响。关键词：猪精液冷冻保存抗凋亡药物RESEARCHESONTHEAPPLICATIONOFANTI-APOPTOTICREAGENTSTOTHECRYOPRESERVATION0FBOARSEⅣ匝NABSTRACTTheobjectiveofthepresentstudywastofurtherimprovethequalityoffrozen．thawedboarsemen

6、andtoprovidereferencedatafortheapplicationofanti．apoptoticreagentstothecryopreservationofboarsemen．Freshsemenwas一一——collectedfromadultboarswiththegloved—handtechnique．Andimmediatelyafterpretreatment，samplesweredilutedinanextendersolutionsupplementedwithdifferentdosesofanti．apopt

7、oticdrugs--melatonin(0，1，5，10mmol／L)，dopaminehydrochloride(0，O．1，1，lOmmol／L)，puerarin(0，O．1，0．01，O．001mmol／L)，ligustrazinehydrochloride(0，0．08，O．1，O．12mrnol／L)，metoprololtartaricacid(0，1，O．1，O．Olmmol／L)，anddichloroacetate(0，1，O．1，0．01mmol／L)．Thenextendedsemenwasfrozenandthawedbe

8、forespermatozoawerestainedwithCoomassiebrillian