医学微生物学实验

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3、课程名称：医学微生物学实验实验内容：1.其他微生物的形态观察(阅片)自阅片：钩体示教片：支原体菌落、梅毒螺旋体、沙眼衣原体包涵体、恙虫病立克次体2.钩体显微凝集试验(示教)3.变形杆菌动力观察(自做)授课对象：本科临床、口腔、麻醉、影像、急诊、五官、肿瘤；船本临床、麻醉等实验方式：讲授＋自做实验教材：一、实验目的与要求：1、熟悉钩端螺旋体、支原体菌落、梅毒螺旋体、沙眼衣原体包涵体、恙虫病立克次体形态与染色性；2、熟悉钩体的显微镜凝集实验原理及观察方法。二、实验内容及时间分配（分钟）：1．讲授30min2．

4、其他微生物的形态观察（阅片）40min自阅片：钩体示教片：支原体菌落、梅毒螺旋体、沙眼衣原体包涵体、恙虫病立克次体3．钩体显微镜凝集试验（示教）20min4．变形杆菌动力观察30min5．小结10min三、重点：钩体显微镜凝集实验原理四、思考题1、支原体与细菌L型的鉴别要点有哪些？2、原体与始体的区别。五、作业：绘示教图4医学微生物学实验五讲稿一、支原体：支原体(Mycoplasma)是一类没有细胞壁，呈高度多形态性，能通过0.45um滤菌器,胞膜富含固醇，含DNA与RNA，呈二分裂繁殖的原核细胞型微生物

5、；支原体是目前所知能在无生命培养基中繁殖的最小的原核细胞型微生物。支原体对营养物质的要求高于一般细菌，除基础营养物质外还需加入10%～20%人或动物血清以提供胆固醇与其它长链脂肪酸。大部分支原体繁殖速度比细菌慢，在合适环境中孵育，约3～4h繁殖一代，在琼脂含量较少的固体培养基上，2~7d长出直径约10～600μm的典型的“荷包蛋样”菌落。低倍镜下观察菌落呈圆形，中心致密隆起，深入琼脂，外周由一层薄的透明颗粒包绕。支原体菌落，Diense染色，×100支原体有许多特性与细菌L型相似，如无细胞壁、呈多形性、能

6、通过滤菌器、对低渗敏感、“油煎蛋”样菌落，但细菌L型在无抗生素等诱导因素作用下易返祖为原菌，支原体则在遗传上与细菌无关。二、衣原体衣原体：严格真核细胞内寄生(与螺旋体区分开来)，具有独特发育周期(与立克次体区分开来)，并能通过细菌滤器(与细菌区分开来)。根据衣原体的抗原结构和DNA同源性的特点，衣原体科(Chlamydiae)分为两个属：衣原体属和嗜衣原体属。衣原体属又分为3个种，即沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis)，鼠衣原体和猪衣原体；嗜衣原体属又分为肺炎嗜衣原体(Chlamydop

7、hilapneumoniae)、鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophilapsittaci)等多个种。4衣原体种类虽多，仅少数能致病，引起人类疾病的衣原体主要为：沙眼衣原体(C.trachomatis,Ct)，肺炎嗜衣原体(C.pneumoniae,Cpn)，鹦鹉热嗜衣原体(C.psittaci,Cps)。衣原体的独特的发育周期在包涵体内完成。沙眼衣原体包涵体发育示意图沙眼衣原体包涵体(眼结膜刮片，Giemsa染色，×1000)(眼结膜上皮细胞轮廓不清楚，眼结膜上皮细胞核边呈帽状的为衣原体包涵体)三、立克

8、次体立克次体(rickettsia)是一类大小介于病毒和细菌之间、以节肢动物为传播媒介、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。立克次体是引起斑疹伤寒、恙虫病等传染病的病原体。对人类致病的立克次体主要包括3个属，即立克次体科的立克次体属（Rickettsia）和东方体属(Orientia)以及无形体科的埃立克体属(Ehrlichia)。大多数立克次体为专性细胞内寄生，以二分裂方式繁殖，生长速度缓慢。培养立克次体常用的方法有动物接种、