天然三倍楷杷基因表达倍性效应的cdna-aflp研究

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1、西南大学硕士学位论文天然三倍楷杷基因表达倍性效应的cDNA--AFLP研究姓名：孙晓荣申请学位级别：硕士专业：果树学指导教师：梁国鲁20120603摘要天然三倍体枇杷基因表达倍性效应的cDNA—AFLP研究果树学专业硕士研究生：孙晓荣指导老师：梁国鲁研究员．三倍体枇杷在生长势、枝条粗度、叶片大小和厚度、叶片组织结构、花器官及果实特性等方面表现出较明显的优势，其无核性状显著提高了果实的可食率，其基因表达和调控机制尚无研究。本试验以同源三倍体枇杷品种单株“森尾早生”和“常白一号”的嫩叶、花蕾和幼果为材料，并以其相应的二倍体嫩叶、花蕾和幼果为对照采用LiCl．C

2、TAJ3的方法提取总ImA，合成cDNA双链，以此为模板进行AFLP分析，对差异片段进行回收、克隆，经测序后进行同源性比对分析。研究结果如下：(1)从20对引物组合中选出了14对引物组合进行扩增，共得到3695条带，其中筛选获得148条差异表达转录衍生片段(TDF)，约占总扩增条带的4％。(2)同源三倍体枇杷只有约1％左右的位点发生了变化，且在不同器官中位点的表达变化存在差异。即嫩叶沉默位点多于激活位点，花蕾激活位点多于沉默位点，而在幼果中表现不规律性。(3)同一位点在不同三倍体单株中的多态性表达存在差异，获得的148个TDF在三倍体枇杷各器官的表达以基因

3、沉默为主。(4)148个差异基因片段的序列在NCBI中进行B1aS仅功能分析，涉及转录调控、代谢过程、抗病性、信号传导、蛋白质合成与降解、细胞组分、未命名蛋白或预测蛋白等功能，还包括一些未找到同源序列和同源性较低的序列。(5)同源三倍体枇杷中表现出基因激活且同源性较高的差异片段分别为TDFl、TDF27、11)F42、TDF46、TDF47、TDF53、TDF93、TDFl09、TDFll7，未找到同源序列或同源性较低的序列为Ⅱ)F60、TDF82、，mF91、TDF95、TDFl01、TDFl02、TDFl07、TDFll6、TDFl36、TDFl42，

4、编号依次为A1．A10(A．a嘶vadon)。(6)同源三倍体枇杷中表现出基因沉默的差异片段分别为TDFlO、TDF5l、TDF70、TDF85、TDFl03、硼DFl10、TDFll2、TDFl20、，mFl21、TDFl22、TDFl24、Ⅱ)F144，全为未知基因，编号依次为S1一S12(S．sil朗ce)。(7)TDF74在两个同源三倍体枇杷品种及其二倍体中共表达，且与蓖麻的锌指H西南大学硕士学位论文蛋白同源性较高。关键词：同源三倍体枇杷，倍性效应，基因表达，CDNA．AFLPAbs仃actStlldyOnQnesDifferentiaUyExpr

5、essedbetween1tiploidandDiploidLoquatm易D咖歹印口以良礁Lindl．)UsingCDNA-AFLPanalysisCandidate：SunXiaorongSupeⅣisors：ProfessorLiangGu01uAbs打actThetriploid10q啦吐showedmoresiglli丘c锄tgrowtlladV印妇gesinmegrowtllpotentialofmebranc：hes，di锄曲％leafsize，thickness，leaftissuestm咖re，floral讲翟阻lsand觚tch聪眦嘶s

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7、ofLiCl·CTABw弱IlScdtocXn铽total鼬、『A，andcDNAw嬲syIldlesizcdt0璐cdas廿let锄1platc如rc￡INA-AFLPaIlalysis．Di绦鹏矾alf．ra舯锄tswererec0Vered，cloned锄dsequ∞ced，andmeresunsareasfIollows：(1)3695trans嘶ptd舐Ved劬舯e幽weregotbyusiIlgfIo谢eeIlpairSof删嘶粥脚airscombmatio娜，锄dof148仃ans嘶ptdedVed劬gm∞tswerc90t，aocolHl血

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