三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测

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1、第27卷第5期水产学报V01．27．No．52003年lO月JOURNALOFFISHERIESOFCHINAOct．，2003文章编号：1000—0615(2003)05—0425—06三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测李雅娟，李霞，丁君，毛连菊，王子臣，常亚青，宋坚，魏杰(大连水产学院农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室，辽宁大连116023)摘要：以皱纹盘鲍的血细胞为材料，采用植物血球凝集素(PHA)体外浸泡法，运用正交实验设计，探讨PHA处理时间、PHA浓度、抽血时间对细胞分裂频度的影响。根据正交实验直观分析结果，得出用血细胞

2、直接制备染色体标本进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测的最优组合：PHA处理时间18h、PHA浓度0．04％，抽血时间22：00—24：00，3因素的主次顺序：PHA处理时间一PHA浓度一抽血时间。并可获得大量图象清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相，是皱纹盘鲍活体倍性检测的最佳方法。同时，通过流式细胞仪测定皱纹盘鲍血细胞DNA相对含量进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测，该方法制样简单，测试速度快。关键词：皱纹盘鲍；血细胞；活体倍性检测；植物血球凝集素；流式细胞仪中图分类号：Q343．244文献标识码：ALivingploidydetection

3、oftriploidHaliotisdiscushannaiLIYa-juan，LIXia，DINGJun，MAOLian-ju，WANGZi—chen，CHANGYa-qing，SONGJian，WEIJie(KeyLabofMariculture&BiotechnologyinAquacultureCeraf,cated6，rtheMinistryofAgriculture，DalianFisheriesUniversi~，Da／／an116023，)Abstract：Inthispaper，meorthogonalexperime

4、ntofthree．factorsandthreelevelsL9(3)wasadoptedusingbloodcorpuscleofHalmtisdiscushannaiwhichwereinvitroimmersinginPHAsolution．TherewerethreefactorsandthreelevelswhichincludedPHAtreatmenttime：6h，12h，18h；PHAconcentration：0．02％，0．04％，0．06％；samplingtime：16：00—18：00，22：00—24：0

5、0，4：00—6：00，respectively．testswererepeatedtwotimes．resultsshowedthattheoptimalcombination9fthreefactorsandthreelevelsinthedetectionoftriploidHaliotisdiscushannaibyusingchromosomespecimensfrombloodcellsoflivingbodiesWas：PHAtreatmenttime18h，pHAconcentration0．04％andsampling

6、time22：00—24：●00．TlleorderofthethreefactorsWasPHAtreatmenttimePHAconcentration--~samplingtime．Undertheoptimalcombinationofthethreefactorsandthreelevelsmanyclear，properlengthandwell—scatteredmetaphasechromosomescouldbeobtained．Itisthebestmethodofdetectingtheploidyofliving

7、Haliotisdiscushannai．I~termirimgtherelativelycontentofbloodcorpuscles’DNAwithflowcytometrycouldalsomakeploidydetection．ButthedeviceWasexpensiveandthemethodWasdificulttobespread．Keywords：Haliotisdiscushannai；blodcell；livingploidydetection；PHA；flowcytometry收稿日期：2002．09．24资

8、助项目：国家863高技术项目(863—819—01—04)．作者简介：李雅娟(1961一)，女，辽宁大连人，硕士，副教授，从事水产动物遗传与育种研究。-fro365．eOill426水产学报27卷随着贝类增