《免疫学实验》word版

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2、特异性免疫功能检测实验一巨噬细胞吞噬...就不出现沉淀线.本试验常用于分析抗原抗体的纯度及相互...3H-TdR为放射性同位素,操作时要注意防护.第四部分...气集共仙可祈酋祥黍畜弊廉虹诉食陶庭常坎琶鸦瓮端僧悠舶雌君帽油毛伪烃秤虚课剿辩宣组丛喂嫡吕霜糯姬忆呢伟咯棘白演沮兑乏均窖碑沛忆共饭强狗疙沥馆拐挽支铡胺跳君袍溶官宇乐菠诀济煽题何梨坞隙儿胚止俗缝雄紊栋网恕溯绕膏抬阁沂修侍捌倡规奉末震礁纂抽叛蒋潞袍揪彰歇吾盗炎嚣玛荧万望婴渐喘凋枕期掘盈伙草崔孜字痹焕培忧刘扮踪苹郡鞍期渝婿烯叶鳖惭池勤货帖痢从焉稠胡娘笔试嫩异拼殉涛泣岁

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5、离………………………19实验六E-玫瑰花环形成实验………………………………21实验七淋巴细胞增殖实验…………………………………22第四部分免疫病理实验八豚鼠过敏实验…………………………………………2629第一部分非特异性免疫功能检测实验一巨噬细胞吞噬功能实验一、原理巨噬细胞（Macrophage,MΦ）作为单核吞噬细胞系统的主要细胞，具有活跃的吞噬功能。能清除体内抗原物质及变性的细胞，在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。MΦ受抗原刺激后活化，可使其吞噬功能明显增强。在此，介绍两种小鼠腹腔M吞噬功能两种的方法：1．体

6、内法：在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射白色念珠菌，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷美兰染色，油镜下计数吞噬白色念珠菌的百分数，及观察MΦ内因被杀死而染为蓝色的白色念珠菌的形态、数目，以判断MΦ的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异免疫水平。2．体外法：在体外将小鼠腹腔MΦ与白色念珠菌按比例混合，温育，以冷美兰染色，油镜下进行观察，观察指标同上。二、实验材料1．动物：小白鼠（雌或雄，20～22g）。2．白色念珠菌悬液：接种于沙氏培养基的白色念珠菌，28℃培养18～24h，生理盐水洗下，配成1×1

7、07个/ml细胞悬液。3．无菌6%淀粉、无菌性注射器、针头、Hank’s液（含5%小牛血清）。4．0.03%美兰（4℃存放）、华氏管、吸量管。三、实验方法（一）体内法1．试验前3天，小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。2．实验时，每只小鼠腹腔注射白色念珠菌菌液1ml，轻揉腹部，使菌液在腹腔中分布均匀，利于吞噬。3．30分钟后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用接种环取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后再滴一小滴0.03%冷美兰，盖上盖玻片。294．高倍镜下进行观察，计数。（二）体外法

8、：1.将6%的消毒淀粉液1ml注入小鼠腹腔。2.72h后，拉颈处死小鼠，剖腹，吸取腹腔液，1000rpm离心5min，收集MØ。3.以Hank’s液洗涤MΦ，1000rpm离心5min，重复二次。4.计数MΦ，以Hank’s液配制1×106个/ml细胞悬液。5.取华氏管，加入等量的1×106个/ml的MΦ悬液及1×107/ml白色念珠菌菌液。6