cd133分子在儿童b系急性淋巴细胞白血病表达的意义及其生物学特性的初步研究

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3、义目的：探讨急性淋巴细胞性白血病(AcutelymphoblasticleukemiaALL)患儿诱导化疗前后骨髓单个核细胞CDl33．1、CDl33．2两种分子的表达与临床预后指标的相关性。方法：选取初诊ALL患儿59例，流式细胞术检测其骨髓单个核细胞CDl33一l和CDl33．2的表达比例。结果：1)初诊B．ALL患几cDl33．1、cDl33．2的表达与其年龄、性别、外周血白细胞计数、骨髓幼稚细胞比例、LDH水平、细胞遗传学改变、融合基因、危险等级、完全缓解(CR)率及白细胞分化抗原CD38、CD58和CD66c等表达均无相关性(胗0．05)(其中4例T-AL

4、L因例数太少，无统计学意义)。2)55例B．ALL中，CDl33．1表达阳性者21例(占38．2％)，CDl33．2表达阳性30例(占54．5％)，二者表达阳性比例有显著差异(P0．05)；结论：1)初诊B．ALL患儿cDl33．1、cDl33．2的表达与其性别、年龄、外周血白细胞计数、骨髓幼稚细胞比例、LDH水平、危险等级、融合基因、细胞遗传学改变、CR率、CD38、CD58、及CD66c等表达均无相关性。2)B．ALL患儿CDl33．2的表达

5、比例明显高于CDl33．1。3)CDl33表达与CD34表达无相关性。二、儿童B系ALL来源的CDl33+细胞生物学特性的初步研究目的：体外分离儿童B．ALL原代白血病细胞CDl33+CDl9+、CDl33+CDl9．等亚群细胞，初步探讨其体外生物学特性。方法：选取4例CDl33表达阳性的B—ALL患儿，经免疫磁珠法(MACS)分选出CDl33+CDl9+与CDl33+CDl9．细胞，并用流式细胞仪对所分选细胞的CDl33．2表达进中文摘要CDl33分子在儿童B系急性淋巴细胞白血病表达的意义及其生物学特性的初步研究行鉴定；分选后的CDl33+CDl9+与CDl33+

6、CDl9．两组亚群细胞，分别接种于含干细胞因子(sCF)、白细胞介素．3(IL．3)和白细胞介素．7(IL．7)的无血清培养基中，悬浮培养4．7周后，流式细胞术检测培养细胞的CDl33、CDl9及CD34的表达，RT-PCR检测其融合基因的表达。同时以MACS分选的cDl33．细胞作对照。结果：1)MAcs法分选B．ALL原代白血病cDl33+cDl9+与cDl33+cDl9．两组亚群细胞，分选后细胞总回收数为(76．9士25．63)×106，较分选前细胞总数f(99．0士21．07)×106】低，细胞总回收率为77．7％，但二者之间无显著差异(P>o．05)；流式

7、细胞术检测所分选的细胞的CDl33．2表达比例，示两者平均比例分别为(77．5士13．61)％、(76．83士5．58)％。2)CDl33+CDl9+、CDl33+CDl9．两组亚群细胞在无血清培养基中悬浮培养平均5周(4．7周)，细胞生长良好，可形成克隆细胞球；通过在4个不同时间点(d0、d14、d28、培养结束前)对两组细胞进行计数，提示cDl33+CDl9+亚群细胞增殖速度更快，且培养至14天左右细胞即进入增殖高峰期，上述4个时间点细胞数差异有统计学意义(P