calpain i-cdk5通路在异丙酚减轻抑郁大鼠电休克后学习记忆损害中的作用

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1、重庆医科大学硕士学位论文CalpainI--Cdk5通路在异丙酚减轻抑郁大鼠电休克后学习记忆损害中的作用姓名：李晓申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：闵苏201205Calpainl-Cdk5通路在异丙酚减轻抑郁大鼠电休克后学习记忆损害中的作用1摘要目的通过观察异丙酚联合电休克治疗(electroconvulsivetherapy，ECT)抑郁大鼠后抑郁行为、学习记忆功能及海马卡配因I(calpainI)．细胞周期依赖性蛋白激酶5(cyclin—dependentkinase5，Cdk5)通路相关蛋白表达的变化，探讨

2、异丙酚减轻电休克后抑郁大鼠学习记忆损害的分子机制。方法成年雄性SD大鼠50只，鼠龄12周，体重211士17g，随机分为5组(刀=10)：正常组(C组)、抑郁组(D组)、单纯异丙酚组(DP组)、单纯电休克组(DE组)、异丙酚联合电休克组(DPE组)。C组正常饲养，其余4组采用慢性轻度不可预见性应激(chronicunpredictablemildstress，CUMS)建立抑郁模型。模型建立成功后，C组、D组和DE组腹腔注射生理盐水8mlNg，DP组和DPE组腹腔注射异丙酚80mg／kg，注射后C组、D组、DP组安装电极但

3、不给予电刺激，DE组和DPE组给予电休克治疗(参数设置为双相矩形波、波幅0．8A、波宽1．5ms、频率125Hz、时程0．8S、电量120mC)。以上处理每天1l基金项目1本研究工作受置寡自然科学基金面上项目(No．3097283I)和11[庆市教委自然科学基金(No．KJ090309)壹助．ThisworkwassupportedbyagrantfromtheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No．30972831)andtheNaturalScienceFoundatio

4、nofChongqingCityBoardofEducation(No．KJ090309)．2重庆医科大学硬士研究生学1蜕文1次，连续7d。于建模前、建模后及治疗后采用糖水偏好实验、Open—field实验(水平活动距离和直立次数)评价大鼠行为学变化，Morris水迷宫(逃避潜伏期和空间探索时间)检测学习记忆功能。所有测试完成后处死大鼠，采用免疫组织化学法检测大鼠海马区calpainI、CaMKIIGt和磷酸化CaMKIIot(pCaMKIIGt)的表达，western-blot法测海马区Cdk5的表达，液闪法测海马区C

5、dk5的活性，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测calpainI及Cdk5mRNA的表达。结果(1)Open—field评分：建模前，各组间大鼠水平活动距离和直立次数差异无统计学意义(胗O．05)；建模后，与C组比，其余4组水平活动距离和直立次数减少(PO．05)；治疗后，与C组比，其余4组水平活动距离和直立次数减少(PO．05)；与D组比，DE组和DPE组水平活动距离和直立次数增加(P

6、。(2)糖水偏好：建模前，各组间大鼠糖水偏好百分比差异无统计学意义(胗o．05)：建模后，与C组比，其余4组糖水偏好百分比降低(尸O．05)；治疗后，与C组比，其余4组糖水偏好百分比降低(P<0．05)，且D组与DP组、DE组与DPE组两两间差异无统计学意义(P>O．05)；与D组LL,DE组和DPE组糖水偏好百分比增加(尸O．05)；建模后，与C组

7、比，其余4组水平逃避潜伏期延长、空间探索时间缩短(PO．05)；治疗后，与C组比，其余4组逃避潜伏期延长、空间探索时间缩短(PO．05)；与D组比，DE组逃避潜伏期延长、空间探索时间缩短(P

8、异无统计学意义(P>0．05)；与D组比，DE组calpmnI蛋白和mRNA表达增加(P