虾青素抗氧化分子机制研究及纳米混悬剂的制备

虾青素抗氧化分子机制研究及纳米混悬剂的制备

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时间:2019-02-20

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1、厦门大学硕士学位论文虾青素抗氧化分子机制研究及纳米混悬剂的制备姓名:梁信芳申请学位级别:硕士专业:药理学指导教师:朱铉201205摘要虾青素(嬲t觚a删妇,3,3’.二羟基.4,4’.二酮.p,F胡萝卜素)属于叶黄素类B.胡萝卜素。研究发现虾青素对人类健康很有益处,对许多疾病都有很好的治疗保护作用。它主要的药理作用包括:抗氧化、抗肿瘤、抗炎、对心血管保护作用及神经保护作用等。前期研究表明,虾青素的抗溃疡作用与氧化应激密切相关,但未在分子水平进行深入研究。因此,本课题以胃癌细胞为研究对象,采用wbStemblo

2、t法检测虾青素刺激后氧化还原信号通路关键蛋白的激活情况,通过DCFH.DA法检测细胞内I的S的改变,分析他们之间的相关性。结果显示,EIⅨ5的激活与细胞内ROS的量之间有一定的相关性,我们通过PEI法建立ERK5过表达细胞,采用M丌法检测ERK5对细胞增殖的影响。结果表明,EIⅨ5能够促进细胞增殖。采用MTT法观察细胞损伤模型的建立和虾青素的保护作用。通过显微镜下观察细胞形态,HoechSt33342染色观察细胞核的情况,AmlexinV/PI双染并经流式细胞仪检测相结合的方法,研究证实AST可以有效减少H2

3、02诱导的细胞凋亡。最后,我们检测了细胞内I的S含量的变化,以及ERK5激活情况。结果表明,ERK5与虾青素抗氧化作用具有相关性。另一方面,与大多数B胡萝卜素一样,虾青素的生物利用度与结构有很大的关系,而水溶性差、性质不稳定都使它的应用受到限制。我们通过乳化.溶剂蒸发法制备虾青素纳米混悬剂。通过单因素分析优化了制备工艺,得到平均粒径7.8I蚰,水中分散性良好的虾青素纳米混悬剂。建立了虾青素的HPLC分析方法对虾青素含量进行定量分析。采用透射电镜拍摄了虾青素纳米分散体的形态,初步考察了制剂于4℃放置3个月的稳定

4、性、细胞摄取和对MGC.803细胞中ERK5的激活情况。结果表明制备的虾青素纳米混悬剂有效提高了虾青素在水中的溶解度及化学稳定性。关键词。虾青素;EIⅨ5;抗氧化;纳米混悬剂AbstractAstax锄曲虹3,3.-dihydroxy·p,p’一carotene-4,4’-dione,beIongst0t11e缅nilyofx柚t110phylls.Asta)【叫tllinh舔coIlsiderablypotential姐dpromisingapplicationsiIlhum锄he出tll锄dn嘣tion,

5、andhaSbeenanmuted埘thexmlordi彻巧potential内rprotectingtheo唱aIlism鹋ainstawidc砌geofdise舔es.MostsigIli丘c卸taCtiVitiesof嬲ta)【觚minincludingitSantioxidative,anticaIlcer,antidiabetic,觚d觚ti-in丑ammatoryproperties,itspr0慨tivee彘ctsonstomach,liver,t量lehean砌tIleb100dvesSels

6、,thenen,ouSsysteIn,tlleeye,tllesbn,锄dotlleractiv“ies.Abo、,eall,weIlotedt11ata11ofthemerapeuticalstudiesof硒tax锄曲iIlongastriculCer’mentiollingtheabili哆ofmeregulationofantioxid锄ten乃,111es,butdosen’tmakefhrmerexpl锄ationaboutthemolecularmechallism.Therefore,huma

7、ngastriccarcinomaceUliIleMGC·803w硒choos明t0studytlle觚tioxid觚te虢ctof私ta)【锄tllill.Westemblot、Ⅳ邪p蚓fo咖edt0teStnlekeyprotei璐ofsomeredox-si印alingsfollowedby船ta)【锄ttlilltreatmem.Ch锄gesofin仃acellularRoSweredetectednu.0ughtlleDCFH-DAmetllod,thenthecon.elationsmp、vere

8、甜曲ysisedbe舭enthem.Itw缎foundthatactiVationofERK5ismolved、析mtllegenerationofROSinM(屺一803cells.E砌为oVerexpressioncellswereemLblishedbyPEI嬲say,menM兀弱哪w弱usedtocX锄mee虢ctofERK50nceIlprolifemtion.111eresultSsho

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