小鼠stgf-β1rⅱ、sil-13rα2受体蛋白对日本血吸虫病肝纤维化细胞信号转导的干预

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1、目录目录...................................................1英文缩略词对照表.......................................2中文摘要...............................................3ABSTRACT...............................................51前言................................................82材料与方法...................

2、......................103结果...............................................314讨论...............................................455结论...............................................506参考文献...........................................51附录一（个人简历）....................................56附录二（致谢）.....

3、...................................57附录三（综述）........................................581中英文词汇对照表英文缩写英文全名中文全名PCRpolymerasechainreaction聚合酶链反应cDNAcomplementaryDNA互补DNAE.coliEscherichiacoli大肠杆菌Ampampicillin氨苄青霉素Kanakanamycin卡那霉素LBluria-BertanimediumLB培养基ORFopenreadingframe开放阅读框SDSsodiumdodecy

4、lsulphate十二烷基磺酸钠PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺电泳TEMEDtetramethylethylenediamine四甲基乙二胺APSammoniumPersulfate过硫酸铵PBSphosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PBSTphosphatebuffersalinetween磷酸盐吐温缓冲液EDTAethylenediaminetetra-aceticacid乙二胺四乙酸HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物酶HSChepaticstellatecell肝星状细胞I

5、L-13Rα2interleukin-13receptorα2白细胞介素13受体α2SEAsolubleeggantigen可溶性虫卵抗原STAT6signaltransducersandactivatorsof信号转导和转录激活因子6transduction6TGFβ1RIItransforminggrowthfactorbeta1typeII转化生长因子β1II型受体receptorECMextracellularmatrix细胞外基质2小鼠sTGF-β1RII、sIL-13Rα2受体蛋白对日本血吸虫病肝纤维化细胞信号转导的干预研究生周超群导师汪学龙教授储德勇副教授中

6、文摘要目的：原核表达和纯化sTGF-β1RII蛋白、sIL-13Rα2蛋白，并研究该蛋白对小鼠日本血吸虫病肝纤维化及其信号转导通路的影响。方法：利用小鼠3T3细胞总RNA，逆转录为cDNA，设计引物，常规PCR法扩增目的基因，构建sTGF-β1RII、sIL-13Rα2蛋白的原核表达系统，在大肠杆菌中获得融合表达，用亲和层析法制备纯化的sTGF-β1RII蛋白、sIL-13Rα2蛋白，Westernblotting鉴定其抗原性。BALB/C雌性小鼠（6-8周龄，体重18-22g）随机分成8组，每组6只，除正常对照组外，其余各组均通过腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴18±2条/鼠

7、，感染后第5周起隔天腹腔注射，持续2w，具体蛋白干预种类剂量见分组：A：正常对照组；B：模型生理盐水组（0.5ml生理盐水/小鼠）；C：sIL-13Rα2蛋白低剂量组（50µg/小鼠）；D：sIL-13Rα2蛋白高剂量组（100µg/小鼠）；E：sTGF-β1RII蛋白低剂量组（2µg/小鼠）；F：sTGF-β1RII蛋白高剂量组（20µg/小鼠）；G：联合干预组（sTGFβ1RII10µg/小鼠+sIL-13Rα275µg/小鼠）；H：sTGF-β1RII蛋白低剂量长疗程（干预4w）组（2µg/小鼠）；在感染后第8周末处死各