休眠诱导期油桃花芽蛋白组和呼吸途径分析

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1、山东农业大学硕士学位论文休眠诱导期油桃花芽蛋白组和呼吸途径分析姓名：谭秋平申请学位级别：硕士专业：果树学指导教师：高东升20120608山东农业大学硕士学位论文中文摘要多年生落叶果树冬天会经历严寒等逆境胁迫，在长期的进化过程中，果树形成了以芽体休眠的方式适应这种逆境，所以在严冬来临前及时建立起休眠状态是芽体发育中一个重要阶段(休眠诱导期)。在花芽休眠诱导进程中，果树芽体通过表达特异基因来感受逐渐改变的环境因子(短日照和低温)而发育，使细胞内发生一系列复杂而有序的变化从而建立起与生长期完全不同蛋白质组成。本实验以十年

2、生的曙光油桃花芽为试材，利用双向电泳和生物质谱分析技术相结合的方法研究花芽休眠诱导期的三个发育阶段(I、II和ⅡI期)的差异表达蛋白质组并同时检测花芽在这三个发育阶段的生理生化变化，获得了如下研究结果：l花芽休眠诱导进程中，我们通过2．DE共发现了13个稳定的差异表达的蛋白点，7个表现出上调趋势，6个表现出下调趋势；应用MS技术成功鉴定出其中的11个蛋白点，将它们进行功能分类后，发现上调的蛋白中6个属于胁迫和防御响应蛋白类，1个属于光合作用类；而下调蛋白中的2个属于糖酵解和能量代谢类，Vi"属于细胞内信号转导和细胞

3、周期调控的蛋白类，1个属于细胞壁重塑和细胞壁代谢蛋白类。2花芽休眠诱导进程中，芽体内自由水含量逐渐降低，尤其在Ⅲ期含量降低更显著：芽体内H202含量先升高后降低，在II期出现峰值。3花芽休眠诱导进程中，芽体总呼吸速率(Vt)下降，三羧酸循环(TCA)途径活性降低；磷酸戊糖途径(PPP)在II期下降，在Ⅲ期增加。4花芽休眠诱导进程中，细胞色素途径活性(pVcyt)和其占总呼吸活性比值(pVcytⅣ。)均降低，但活性高于交替途径实际活性(pValt)；交替途径实际活性(pVa。)和其占总呼吸比值(pVat／Vt)均在I

4、I期下降，在Ⅲ期增加。综上所述，可以发现油桃花芽休眠诱导进程中芽体内发生了复杂的变化。差异表达蛋白质组实验结果表明：II期是芽体细胞分裂和生长开始停止的阶段：Ⅲ期是芽体获得并增强其抗逆能力的关键时期；呼吸代谢途径的实验结果表明：三羧酸(TCA)生化呼吸途径和细胞色素途径活性(pV哪)是芽体休眠诱导进程中主要的ATP提供者，而磷酸．戊糖途径(PPP)和交替途径实际活性(pVaJt)在III期具有重要作用。关键词：油桃花芽；休眠诱导；蛋白质组学；呼吸途径休眠诱导期油桃花芽蛋白质组和呼吸途径分析AnalysesofPro

5、teomeandRespiratoryPathwaysofNectarineFlowerBudduringDormancyInductionAbstractTosurvivecoldanddesiccatingstressinwinter，deciduousfruittreesadoptedastrategyprogressiveestablishingadormantstatewithinbudinautumntoadaptthemselvestothestress，whichwasacquiredduringt

6、helongcourseofevolution．Hence，timelyestablishingthedormantstateWasallintegratedeventinbuddevelopmentalprogressandWasessentiallyachievedattheendofdormancyinduction．Duringthatstage，setsofuniquegenesweretemporallyexpressedinbudstoenablethemselvestosensetheenviron

7、mentalchangesandtomodulatetheirdevelopment,leadingtoaseriesofcomplicatedbutorderproteomiechangesdistinguishedfromthoseofgrowthperiod．Inthisstudy，combinationof2-DEwitIlMSanalysisWasusedtoexplorethedifferentiallyexpressedproteinsinfloralbudsoftenyearold‘Shuguang

8、’nectarine(Prunuspersicavat．Nectarianacv．Shuguang)tree．DormancyinductionwasartificiallydividedintothreedifferentstagesdenotedrespectivelyasI、IIandIIIstage．Proteinswhoseexpressionle