菟丝子水提液对大鼠胚胎发育毒性的实验研究

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1、遵义医学院硕士学位论文菟丝子水提液对大鼠胚胎发育毒性的实验研究姓名：夏卉芳申请学位级别：硕士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：李啸红201205遵义医学院硕士学位论文中文摘要菟丝子水提液对大鼠胚胎发育毒性的实验研究中文摘要目的：探究菟丝子水提液对孕鼠及胚胎发育的影响。方法：1．急性毒性试验：最大耐受剂量(MTD)法检测菟丝子水提液对SD大鼠的急性致毒。2．大鼠致畸实验与微核实验：选SD孕鼠60只，分6组，每组10只。菟丝子水提液高、中、低剂量组(即409／kg、209／kg、109／kg)及阴性对照组(NS，lml／1009)，于孕第6~18天每日灌胃一

2、次。阳性对照组(致畸实验)，环磷酰胺(CP)12．5mg／kg于孕第13天腹腔注射1次。阳性对照组(微核试验)，CP40mg／蚝，分别于孕第17、18天每日腹腔注射1次。各组孕鼠均于孕18天麻醉、取材检测：①孕鼠体重、子宫与卵巢重量指数、卵巢黄体数；胚胎植入情况、活胎率、胎吸收率、死胎率，胎盘重。②胚胎体重(湿重与干重)、身长与尾长；畸形胚胎及骨骼发育测量。③孕鼠骨髓嗜多染红细胞微核率、胚胎肝嗜多染红细胞微核率。3．大鼠胚胎肢芽培养试验：选成年SD雄鼠12只，菟丝子水提液分别按高、低(409／kg、109／kg)剂量、NS(1ml／1009)、CP(40m

3、g／kg)4组剂量灌胃后制备含药血清备用。另选孕第14．5天SD孕鼠无菌条件下取出胚胎，切取前肢芽分成4组(15个前肢芽／组／次试验)，各组按培养体积的10％；0H含药血清培养72小时，收获各组肢芽进行处理、检测：①取10只肢芽／组，体视镜下测量长度、染色透明后行Neubert评分。②取5只肢芽／组，制备细胞悬液光镜下检测肢芽细胞凋亡率。结果：1．菟丝子水提液经口对SD大鼠的最大给药量为809／蚝。2．菟丝子水提液的大鼠致畸试验与微核试验：①菟丝子水提液各组对孕鼠的体重增长率、生殖器官重量指数、黄体数、胚胎植入与阴性对照组相比，无显著性差异(P>0．05)

4、。②菟丝子水提液中、低剂量组胚胎的身长、尾长、胚胎体重、遵义医学院硕士学位论文中文摘要胚胎干重、胎盘重、上枕骨骨化级别与阴性对照组比无显著性差异(尸>0．05)，而高剂量组与阴性对照组比有显著差异(尸<0．05)：菟丝子水提液各剂量组对胚胎外观形态、躯干骨、后肢骨和前肢腕骨、爪骨的发育与阴性对照组比，无显著性差异(尸>0．05)。而阳性对照组以上所有数据均比阴性对照组低，有显著差异(P

5、20g、10∥kg-d)对孕鼠骨髓细胞、胚胎肝细胞嗜多染红细胞微核率与阴性对照组比，无显著性差异(P>0．05)。3．菟丝子水提液含药血清对SD大鼠胚胎肢芽发育的影响：①菟丝子水提液低、高剂量含药血清培养E14．5前肢芽72h，体视镜(10倍)测量前肢芽长度、软骨发育分化Neubert评分与阴性对照组比较，无显著差异(尸>0．05)。而阳性对照组(CP组)则比阴性对照组发育差，两者相比具有显著性差异(P<0．01)。②菟丝子水提液高、低剂量含药血清组肢芽细胞凋亡率与阴性对照组相比，无显著差异性(P>0．05)。结论：1．菟丝子水提液对SD大鼠经VI最大给药

6、量大于80g／l(g，属无毒级。2．菟丝子水提液剂量达409／kg时，对孕鼠体重、植入、生殖器官重量无毒性。3．菟丝子水提液灌胃SD孕鼠剂量达(409／kg)时，对胚胎发育有轻微影响，但未致畸；而在209／kg以下剂量时对胚胎的发育无毒性影响。4．菟丝子水提液灌胃剂量在409／kg时可诱发孕鼠及胚胎微核率增加，有潜在遗传毒性；而在209／kg以下剂量时无遗传毒性。5．菟丝子水提液的含药血清对体外培养大鼠肢芽整体发育及细胞凋亡率无影响。关键词：菟丝子；致畸试验；肢芽培养；微核；Neubert评分2遵义医学院硕士学位论文英文摘要StudyonEmbryonic

7、DevelopmentalToxicityOfWaterExtractofCuscutaeAbstractObjective：Studyonratembryomcdevelopmentofwaterextractofcuscutae．Methods：1．SDratemergencypoisonofwaterextractofcuscutaewasdetectedbymaximumtolerateddosemethod．2．Teratologytestingandmicronucleustestofrats：60pregnantratswhichweredi

8、videdimo6groups(10ratsineverygrou