舒郁胶囊对抑郁症肝气郁结证模型大鼠海马作用靶点基因筛选及5-ht受体相关基因差异表达的验证

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1、摘要目的：用基因芯片检测抑郁症肝气郁结证模型大鼠海马内5-HT受体相关基因的表达变化，初步探讨抑郁症肝气郁结证对海马内5-HT受体的作用机制，并研究调肝方药舒郁胶囊和柴胡皂苷对该病证的干预作用。方法：旷场试验筛选大鼠，采用慢性温和应激法（CMS）复制抑郁症肝气郁结证大鼠模型，模型评价采用糖水偏好实验、旷场试验等。以西药氟西汀为阳性药，并用调肝方药舒郁胶囊和柴胡皂苷进行干预。采用基因芯片检测大鼠海马内差异基因表达情况，比较模型组大鼠、正常组大鼠、舒郁胶囊干预组大鼠、柴胡皂苷干预组大鼠与氟西汀干预组大鼠之间的差异表达基因；用实时荧光定量PCR技术验证5-HT受体相关

2、基因差异表达结果的可靠性。结果：造模刺激4周后，与正常组相比，模型组旷场实验得分有显著性减少（P<0.01）。与模型组相比，舒郁组、氟西汀组和柴胡组的得分均有显著性增加(P<0.01，P<0.001，P<0.05)，但三组之间比较没有显著性差异（P>0.05）。模型组大鼠糖水摄入量较正常组、舒郁组及氟西汀组显著降低（P<0.05，P<0.05，P<0.01），说明抑郁症肝气郁结证模型成功，而舒郁胶囊和氟西汀能明显对抗抑郁大鼠糖水摄入量的减少，但两者之间没有显著性差异（P>0.05）。柴胡皂苷不能明显改善抑郁大鼠糖水摄入量的减少，但也有一定的作用趋势。采用含有41

3、000个己知基因的大鼠全基因组芯片检测大鼠海马内差异基因表达情况，结果显示模型组、正常组、舒郁组、柴胡组与氟西汀组之间的Htr1a,Htr5b,Htr2c,Htr3a基因存在差异表达。实时荧光定量PCR方法分别检测了Htr1a,Htr5b,Htr2c,Htr3a的表达情况，检测结果与基因芯片的结果基本一致，验证了4个目的基因结果的可靠性。结论：采用CMS法可以成功制备抑郁症肝气郁结证大鼠模型，糖水偏好实验、旷场试验均可评价模型的有效性。各组大鼠海马中Htr1a,Htr5b,Htr2c,Htr3a差异表达，可能是抑郁症肝气郁结证发病的中枢机制之一；中药舒郁胶囊和柴

4、胡皂苷可以有效纠正上述基因表达异常的状态，可能是药物治疗该病症的机制之一。关键词：抑郁症肝气郁结证；5-羟色胺受体；基因芯片；实时荧光定量PCR；舒郁胶囊；柴胡皂苷VerificateandanalysetheeffectsofShuyucapsuleontheexpressionof5-HTreceptorsinmodelratsofLiverQidepressionwithgenechipbyrealtimePCRSpecialty:PharmacologyofTraditionalChineseMedicineTutor:Hui-yunZhangAutho

5、r:HangJinAbstractObjective:Ouraimistodetecttherelationshipbetween5-HTreceptorsgeneexpressionchangesinhippocampusofmodelratwithliver-qidepression,whichgivesapreliminarydiscussiononthepathogenesisofdepressionemotion,aswellasstudiestheeffectsofShuyucapsule&RadixStellaviae.Methods:Afterb

6、eingchosen，liver-qidepressionmodelratswerepreparedbyusingchronicmildstress（CMS）method.Andthentheratswereevaluatedbysucrosepreferencetestandopenfieldtest.Weusedfluoxetineasmasculinemedicine,detectedthe5-HTreceptorgeneexpressionchangesinhippocampusofratsinthegroupsincludingthenormalgro

7、up,liver-qidepressionmodelgroup,andthethreetreatmentgroupsbyusinggenechipsandreal-timequantitativePCR.Results:Comparedwiththenormalgroup,thetotalscoreofopenfieldtestofratsinliver-qidepressionmodelgrouplessenedsignificantly(P<0.01)andthesucroseintakeofpreferencetestdecreasedobviously(

8、P<0.01).Onth