缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响以及bax、gsh-px表达变化的研究

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1、中图分类号：R89；R36；R39硕士学位论文缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响以及BAX、GSH-PX表达变化的研究院（系）、所临床医学院研究生姓名孙星亮学科、专业神经病学导师姓名李小刚教授二Ο一二年四月目录全脑缺血预处理对早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响1及BAX、GSH-PX表达变化的研究„„„„„11.1中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„11.2英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„31.3前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51.4材料与方法„„„„„„„„

2、„„„„„„„„„„„„71.5结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„121.6讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„241.7结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„301.8参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„311.9英汉缩略词对照表„„„„„„„„„„„„„„„„„352致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„363（综述）„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„39缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响以及BAX、GSH-PX表达变化的研究摘

3、要目的：通过研究缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响及BAX、GSH-PX表达变化，从而揭示缺血预处理对脑干的神经保护可能机制，进一步为脑干缺血耐受增强提供依据，并在临床上为后循环溶栓时间窗的选择提供参考依据。方法：1雄性SD大鼠144只,体重300——320g,随机分为假手术组、缺血组、缺血再灌注组、缺血预处理组（缺血组分为缺血1h、2h、3h、4h、5h，缺血再灌注组分为缺血1h再灌注7h,2h再灌注6h，3h再灌注5h，4h再灌注4h，缺血5h再灌注3h五个观察时间点，每组个观察点8只大鼠，缺血预处理组先给予全

4、脑缺血预处理3分钟，72小时后再给予脑干缺血再灌注，各时间点同缺血再灌注组）2缺血预处理组采用改良的pulsinelli四血管阻断方法给予缺血预处理组大鼠全脑缺血预处理3分钟，间隔三天后制备脑干缺血再灌注模型，缺血再灌注组应用微型动脉夹夹闭基底动脉后间隔不同时间点打开动脉夹使血管再通，缺血组只夹闭基底动脉相应时间，各组造模成功并纳入实验后在相应时间点处死取材。3采用HE染色应用光镜观察细胞结构变化4采用TTC染色及脑干BAEP观察脑干缺血范围及程度5采用免疫组化观察BAX变化6采用酶联免疫吸附(ELISA)法观察GSH-PX的变化。结

5、果：（1）HE染色可见假手术组神经细胞形态结构正常；缺血组随着缺血时间延长逐渐出现细胞水肿、炎性反应、细胞核固缩等逐渐加重表现。缺血再灌注组及缺血预处理组有类似的表现，同缺血组比较，在I3R5及之前，缺血组细胞损伤重于缺血再灌注组，之后相反，缺血预处理组时间点则推迟在I4R4。缺血预处理各时间点损伤轻于缺血再灌注组。（2）TTC染色显示假手术组各时间点均未见缺血表现，其余三组1h及在I1R7均未见明显缺血表现；缺血再灌注组缺血情况小于缺血组，之后相反；在I2R6、I3R5、I4R4缺血预处理组小于于缺血组，之后相反。（3）BAEP变化

6、：缺血再灌注组在I1R7、I2R6、I3R5与缺血组1h、2h、3h时间点潜伏期（PL）相比较，缺血组大于缺血再灌注组（P<0.05)，此后各时间点相反；缺血预处理组在I1R7、I2R6、I3R5、I4R4与缺血组1h、2h、3h、4h时间点潜伏期（PL）相比较，缺血组大于缺血预处理组（P<0.05).此后各时间点相反。缺血组Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波峰间期（IPL）在1h、2h、3h与缺血再灌注组在I1R7、I2R6、I3R5相比缺血组大于缺血再灌注组（P<0.05)，此后各时间点结果相反（P<0.05)；缺血预处理组Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、

7、Ⅰ-Ⅴ波峰间期（IPL）在I1R7、I2R6、I3R5、I4R4与缺血组在1h、2h、3h、4h缺血预处理组小于缺血组（P<0.05)，在此后各时间点结果相反。（4）免疫组化BAX显示：假手术组BAX少量或没有表达；缺血组组在1h与缺血预处理组I1R7比较没有统计学意义(P>0.05);在2h、3h、4h与缺血预处理组I2R6、I3R5、I4R4相比较，缺血组BAX大于缺血再灌注组（P<0.05)，之后时间点结果相反；缺血预处理组在I1R7时间点与缺血再灌注组比较没有显著差异(P>0.05)，其余各时间点BAX表达均小于缺血再灌注组（

8、P<0.05)。（5）GSH-PX活性变化：假手术组GSH-PX活性稳定，没有明显变化。缺血组自缺血1h开始GSH-PX活性逐渐降低。缺血预处理组在I1R7与缺血组1h比较没有统计学意义(P>0.05)，在I2R6、I3