鸡毒害艾美耳球虫mic5基因在大肠杆菌的重组表达产物抗原性分析

《鸡毒害艾美耳球虫mic5基因在大肠杆菌的重组表达产物抗原性分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：爿讧芦＼＼时间：。男年多月和关于学位论文使用授权的说明本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：新疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段

2、保存、汇编学位论文，允许论文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。，(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：到哏聊虢磊厶∥、了导师签名：妒／。。’＼”／IJ，I洲⋯I。时间：。踔臼商帆护髟7日新疆农业大学硕+学位论文引言鸡球虫病是由原生动物亚界、复顶器门(Apicomplexa)、孢子虫纲(Sporozoasida)、球虫亚纲、真球虫目(Eucoccidiofida)、艾美耳科(Eimefiidae)、艾美耳属(Eime—a)的球虫寄生于鸡的消化道

3、肠上皮细胞内所引起的一种严重危害养禽业的主要疫病之一，呈全球性分布nq’。球虫卵囊随感染鸡的粪便排出，其在外界适宜的温度、湿度和氧分压条件下进行孢子化生殖，1～2天后发育为具有感染能力的孢子化卵囊。孢子化卵囊被易感的鸡吞食后在肌胃机械磨损下释放出孢子囊，随着食物进入肠道，孢子囊在胰蛋白酶和胆汁的作用下释出子孢子。子孢子侵入肠上皮细胞，经裂殖生殖后形成许多裂殖子H1。球虫在裂殖生殖阶段致病性最强。球虫具有宿主和寄生部位的特异性，即种间存在病原性差异，所以自然感染的宿主对球虫的免疫反应性也具有种特异性，即对一个虫种具有免疫力的机体对另一个虫种不一定

4、有免疫力侣1。因此，深入研究球虫与宿主的相互关系是进行球虫病预防控制的关键。球虫是直接发育型寄生虫，生活史周期短，繁殖力强大，孢子化卵囊的抵抗力很强，使鸡群尤其是集约化养鸡场极易暴发此病【51。该病的发病率可达50％--一70％，死亡率为20％"-30％，在严重时可高达80％。在各种鸡病中球虫病的发生率最高，占1／6～1／5。据Bhogal哺1(1992)报导，全球每年因鸡球虫病造成的损失高达20亿美元，抗球虫药每年的消费是3．2亿美元。Allen哺1(2002)更进一步指出，美国因球虫病引起的经济损失每年可高达6。4亿美元；WilliamsH

5、l(1999)曾对英国养鸡业的生产数据进行精确统计并用数学模型评估，结果显示1995年该国的养鸡量为6．5亿只，因球虫病而导致的经济损失高达3860万英镑(合人民币4．825亿元)i其中80．6％是因生产性能降低造成的损失，17．5％是给药费用。因此，对球虫病的预防控制己得到了普遍关注和高度重视。目前对球虫病的控制仍主要以药物为主，但由于鸡球虫抗药性虫株的不断产生、研制新药的费用昂贵、公众对肉蛋中药物残留关注意识的增强等原因，采用球虫疫苗进行免疫预防已成为公认的控制球虫的理想方法。国内外已陆续研制了多种鸡球虫疫苗并用于临床免疫，如美国的Cocc

6、ivac、加拿大的Immucox、英国的Paracox、捷克的Livacox、中国的EimedvaxPlus等陋101。这些疫苗均为活苗，包括早熟株选育弱毒苗、鸡胚传代致弱苗、辐射致弱苗、化学诱变致弱苗、强毒虫苗等，在球虫病的预防方面起到了较大的作用。但是，由于这些疫苗有些属于弱毒甚至是强毒苗，虽然它们可以刺激动物机体产生坚强有效的免疫力，然而这类疫苗存在以下缺点：①制作过程繁杂；②疫苗需要I鸡毒害艾美耳球虫MIC5基因在大肠杆营的重组表达产物抗瑷性分析低温贮存；③致弱虫株潜在毒力返强且可能进化为更强虫株；④疫苗接种不当可能导致鸡群发病甚至死亡

7、。分子生物学技术的发展为新型球虫疫苗的开发提供了可能，应用分子生物学技术构建的基因工程疫苗能克服传统球虫疫苗的缺点，因此成为疫苗研究的新方向。但是，在新型疫苗开发中筛选有效的保护性免疫原，设计最有效的抗原递呈系统仍是一个难点。近年来，人们通过建立表达性DNA或eDNA文库，再用不同的抗体进行筛选，已发现了许多保护性抗原，并作了大量免疫保护性试验，取得了一定的成果。Profous-JuchelkaH⋯1等利用Etenella子孢子多抗血清从Etenella孢子化卵囊的MtlleDNA表达文库中筛选出一个eDNA片段，命名为S07，是第一个被发现的

8、折光体相关蛋白，其分子质量为26ku，其体外表达产物能与最tenella、Eacervulina和Emaxima的抗体反应，说明有种间交叉反应。用其免