染料木黄酮对人结肠癌sw620细胞株增殖、凋亡影响的实验研究

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1、泸州医学院硕士学位论文染料木黄酮对人结肠癌SW620细胞株增殖、凋亡影响的实验研究姓名：李放霓申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：孙兴旺201204㈣染料木黄酮对人结肠癌SW620细胞株增殖、凋亡影响的实验研究摘要目的：研究染料木黄酮(genistein，Gen)对人结肠癌SW620细胞株增殖、凋亡、细胞周期分布及其对SW620细胞Survivin和Bcl．2mRNA表达的影响，探讨Gen在SW620细胞凋亡过程中可能的作用机制。方法：体外培养人结肠癌SW620细胞株：1．用MTT法检测不同

2、浓度(6．251xrnol／L、12．51amol／L、251xmol／L、50pmol／L、1001xrnol／L)的Gen处理SW620细胞后，SW620细胞的生长抑制效应；2．流式细胞技术检测不同浓度(25lxrnol／L、501xrnol／L、100肛nol／L)的Gen处理SW620细胞48h后，SW620细胞凋亡和细胞周期分布的变化；3．逆转录．聚合酶连反应(RT-PCR)检测不同浓度(2519nol／L、509mol／L、1001amol／L)的Gen作用于SW620细胞48h后，Gen对SW

3、620细胞Survivin、Bcl．2mRNA表达的影响。4．实验结果用SPSS19．0进行统计分析，以P<0．05作为有统计学意义，结果．：1．MTT结果显示，不同浓度(6．251xrnol／L、12．51xrnol／L、251amol／L、501xrnol／L、1001xrnol／L)的Gen作用于SW620细胞24h、48h、72h后，均可抑制SW620细胞的增殖；且随着Gen浓度的增加和作用时间的延长，Gen对SW620细胞增殖的抑制作用逐渐增强，呈现出时间．浓度依赖性，差异有统计学意义(尸<0．0

4、5)。2．不同浓度(25pmol／L、50肛nol／L、1009mol／L)的Gen对$W620细胞作用48h后，SW620细胞凋亡及周期分布检测：不用浓度(25}xmol／L、501xrnol／L、1000mol／L)的Gen作用于SW620细胞48h后，其早期凋亡率和晚期凋亡率明显增高；随着Gen浓度的增加，SW620细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率也逐渐增高，差异有统计学意义(P

5、显上升，G2／M期细胞数目逐渐减少，差异有统计学意义(氏0．05)，提示随着Gen浓度的增高可使SW620细胞被阻滞在S期；3．RT-PCR结果显示，不同浓度(259mol／L、509mol／L、100pmol／L)的Gen作用于SW620细胞48h后，Survivin、Bcl．2mRNA在人结肠癌SW620细胞中的表达均下降，差异有统计学意义(尸

6、过直接或间接下调SW620细胞中Survivin、Bcl．2mRNA的表达诱导SW620细胞的凋亡并抑制其增殖，从而发挥其抗肿瘤的作用。关键词：Gen；人结肠癌细胞株SW620；增殖；凋亡；Survivin基因；Bcl．2基因ExperimentalstudiesontheeffectsofGenonproliferation，apoptosisinhumancoloncarcinomaSW620celllineAbstract：Objective：ToinvestigatetheeffectsofGeno

7、nproliferation，apoptosisandcellcycledistributioninhumancoloncarcinomaSW620celllinesaswellastheexpressionofsurvivinandbcl-2andexploreitspotentialmechanismintheprocessofSW620cellapoptosisofGen．Methods：HumancoloncarcinomaSW620celllineswereculturedinvitroandtr

8、eatedbythefollowingfoursteps：1．TodetecttheeffectsonthegrowthinhibitionofSW620cellstreatedbygenisteinwithdifferentconcentration(6．25}tmol／L，12．5}tmol／L，25I_tmol／L，50pmol／L，100pmol／L)usingMTT．2．Theapoptosisandc