左旋门冬酰胺酶对jurkat细胞株增殖凋亡影响的研究

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1、左旋门冬酰胺酶对jurkat细胞株增殖凋亡影响的研究郭玉玲卢愿孙立荣仲任李学荣(青岛大学附属医院血液儿科山东青岛266003)【摘要】目的：研究左旋门冬酰胺酶对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株牛长的影响。方法：在倒置相差显微镜下观察jurkat细胞经左旋门冬酰胺酶处理前后的牛长状态，Gimsa染色观察L-Asp处理前后jurkat细胞的形态变化。通过琼脂糖凝胶电泳检测经不同浓度左旋门冬酰胺酶处理后的jurkat细胞的DNA片段。用流式细胞术检测jurkat细胞经不同浓度门冬酰胺酶处理48小时后的凋亡率及死亡率。结果：终浓度为l

2、lU/ml>2.5IU/ml、5IU/mk10IU/mlL-Asp均可诱导jurkat细胞发生凋亡和死亡,L-Asp终浓度为2.5IU/ml时jurkat细胞凋亡率最高，死亡率随L-Asp浓度增高而升高；凋亡细胞基因组DNA片段化断裂，凝胶电泳可见梯状条带。结论：左旋门冬酰胺酶可以诱导jurkat细胞发牛凋亡，其凋亡细胞DNA发牛片段化断裂，凋亡率与左旋门冬酰胺酶浓度有关。【关键词】左旋门冬酰胺酶；白血病；细胞凋亡;jurkat细胞株【中图分类号】R392【文献标识码】A【文章编号12095-1752(2015)07-0053-04

3、ThestudyofeffectsofL-asparaginaseon?jurkatCells’proliferationandapoptosisGuoYuling丄uYuan’SunLirongZhongRen丄iXuerong.DepartmentofPediatricHematology,theAffiliatedHospitalofQingdaoUniversity,Qingdao266003,ShandongProvinee,China[Abstract]ObjectiveTostudytheeffectsof

4、L-asparaginaseontheproliferationandapoptosisofhumanacuteT-cellleukemiaJurkatcells.MethodThemorphologicalchangeswereobservedunderamicroscopewithGimsastainedcells.DNAfragmentsweredetectedbyAgarosegelelectrophoresis.CellapoptosiswasanalysedbyFlowcytometry.ResultsThejurkat

5、cells’treatedwithL-AspintheconcentrationofllU/mk2.5IU/ml>5IU/ml>10IU/mlfor48h,canbeinducedapoptosisanddeath.Thejurkatcells’apoptosisratewashighestwhentreatedwiththeconcentrationofL・Aspwas2.5IU/ml.Thejurkatcells’mortalityratesincreasedwithL・Aspconcentrationr

6、iseing.DNAIaddercanbeshowedbyDNAelectrophoresisafterthejurkatcellsweretreatedwithllU/ml>2.5IU/ml、5IU/ml>lOlU/mlL-Asp.ConclusionsTheapoptosisofJurkatcellscanbeinducedbyL-Asp.ApoptoticDNAoccursgragmentation.ApoptosisrateisassociatedwithConcentrationofL・Asp・【Keywords]L-as

7、paraginase儿eukemia;Apoptosis;Jurkatcells急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblasticleukemia’All)是儿童最常见的恶性肿瘤，严重威胁着儿童的健康。近年来，以左旋门冬酰胺酶(L-Asp)为主的联合化疗及髓外预防措施的实施使儿童急性淋巴细胞白血病的长期无病生存率达80%[l],L-Asp已经成为儿童急性淋巴细胞白血病化疗方案中的必要组成部分，其重要性毋庸赘述。关于L-Asp的抗肿瘤作用机制仍未完全明确，目前普遍认为与L-Asp耗竭血液中的门冬酰胺从而阻断肿瘤细胞蛋白质合成有关

8、，但有研究示L-Asp作用后Asn的耗竭程度与细胞的增殖抑制程度不相平行[2],儿童ALL患儿门冬酰胺合成酶表达水平与其对L-Asp的敏感性无相关性[3],这就提示，L-Asp抗肿瘤作用可能存在其他机制，近年有文献报道L-Asp可诱导