微囊藻毒素lr雌性性腺毒性及对雌孕激素分泌的影响

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1、分类号:R994.6学校代码:10392学科专业代码:100402学号:200901465福建医科大学硕士研究生毕业论文微囊藻毒素LR雌性性腺毒性及对雌孕激素分泌的影响EffectofMicrocystin-LRonGonadalToxicitiesandSecretionofEstradiolandProgestoneinFemaleMice学位类型:医学硕士学位所在学院:公共卫生学院研究生:陈雨萍学科、专业:劳动卫生与环境卫生学导师:陈华教授研究起止日期:2010年06月至2012年06月答辩日期:2012年06月06日二○一二年六月六日万方

2、数据1万方数据目录缩略词表……………………………………………………………3中文摘要……………………………………………………………4英文摘要……………………………………………………………6前言……………………………………………………………9材料方法……………………………………………………………11结果……………………………………………………………20讨论……………………………………………………………38结论……………………………………………………………44参考文献……………………………………………………………45致谢…………………………………………

3、…………………49综述……………………………………………………………502万方数据英汉缩略词对照表英文缩写英文全称中文名词CATcatalase过氧化氢酶cDNACompletementaryDNA互补DNADEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMSOdimathylsulfoxide二甲基亚砜E2estradiol雌二醇FSHFolliclestimulationhormone促卵泡生成素GCgranulosacell颗粒细胞HEHematoxylin-eoxin苏木素-伊红LHLuteinizinghormone黄体生

4、成素MC-LRmicrocystin-LR微囊藻毒素LRMTTmethylthiazolyltetrazolium噻唑蓝mRNAMessengerRNA信使RNAPprogesterone孕酮PMSGPregnantMareSerumGonadotrophin孕马血清促性腺激素QRT-PCRReal-timeQuantitativereverse实时荧光定量逆转录聚transcription-polymerasechainreaction合酶链反应ROSreactiveoxygenspecies活性氧族3万方数据微囊藻毒素LR雌性性腺毒性及对雌孕

5、激素分泌的影响中文摘要目的:通过体内和体外模型,观察MC-LR雌性性腺毒性及对雌孕激素分泌的影响,为MC-LR的生殖毒性作用及机制研究提供新的线索和实验依据。方法:1.体内染毒实验:成年健康雌性清洁级昆明种小鼠48只(经筛选后小鼠动情周期相对规律的),按体重随机分为4组,每组12只,染毒剂量分别为0、3.75、7.5和15μg/kg。每天按体重腹腔注射MC-LR一次,连续染毒16天。实验结束,于小鼠动情间期处死,观察指标包括体重、动情周期、子宫和卵巢及肝肾脏器系数、子宫和卵巢组织病理、血清激素水平、卵巢组织Star、P450scc和P450aro

6、mmRNA表达。2.体外染毒实验:无菌条件下分离提取21日龄雌性昆明种小鼠卵巢颗粒细胞,以0、5、10、20μg/mlMC-LR染毒卵巢颗粒细胞,分别检测染毒24h、48h、72h细胞增殖情况和细胞培养液中雌二醇(E2)和孕酮(P)含量;以0、5、10、20μg/mlMC-LR染毒小鼠卵巢颗粒细胞48h,并设CAT+20μg/mlMC-LR干预组和CAT对照组,测定细胞内ROS含量及卵巢颗粒细胞StAR、P450scc和P450arommRNA的表达结果:体内染毒实验结果1.染毒结束,最高剂量组体重低于对照组(P<0.05);7.5和15μg/k

7、g剂量组子宫和卵巢脏器系数低于对照组(P<0.05),而肝脏脏器系数高于对照组(P<0.05);15μg/kg剂量组肾脏脏器系数高于对照组(P<0.05)。2.7.5μg/kg剂量组动情期延长,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);15μg/kg剂量组与对照组比较动情间期延长并伴有动情周期的延长(P<0.05)。3.卵巢组织学观察:3.75和15μg/kg剂量组闭锁卵泡数目与对照组比较呈现上升趋势(P<0.05),而成熟卵泡数目与对照组比较呈下降趋势(P<0.05);3.75μg4万方数据/kg剂量组与对照组比较初始卵泡数目下降(P<0.

8、05),黄体数目上升(P<0.05);7.5ug/kg剂量组可见较多生长卵泡(P<0.05)。4.血清孕酮水平随着剂量的上升呈下降趋势;

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