外源性降钙素通过上调子宫内膜上皮细胞β3表达促进胚泡植入

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1、分类号学号D200978399学校代码10487密级博士学位论文外源性降钙素通过上调子宫内膜上皮细胞β3表达促进胚泡植入学位申请人：熊婷学科专业：妇产科学指导教师：章汉旺教授答辩日期：2012年4月AdissertationsubmittedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnologyfortheDegreeofDoctorofMedicineAdministrationofexogenouscalcitoninpromotesimplantationofblastocystbyup-regulatingβ3expressioninendometrial

2、epithelialcellsD.Candidate:XiongTingMajor:ObstetricsandgynaecologySupervisor:Prof.ZhangHanwangHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaApril,2012独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声

3、明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目录主要缩略词表………………………………………………………………1摘要…………………………………………………

4、………………………2Abstract………………………………………………………………………31前言……………………………………………………………………52主要材料与试剂2.1动物及细胞株……………………………………………………72.2试剂和抗体………………………………………………………72.3主要仪器和器材…………………………………………………93实验方法3.1动物实验及处理…………………………………………………103.2细胞培养及处理…………………………………………………113.3实时定量PCR（real-timePCR）…………………………………123.4免疫组化…………………………………

5、………………………143.5蛋白质印迹（WesternBlot）……………………………………173.6流式细胞术………………………………………………………183.7酶联免疫吸附实验（ELISA）…………………………………193.8粘附实验…………………………………………………………193.9铺展实验…………………………………………………………203.10胚泡移植实验……………………………………………………213.11统计学分析………………………………………………………224实验结果4.1外源性降钙素促进小鼠子宫内膜β3、HB-EGF和LIF表达…224.2降钙素上调子宫内膜上皮细胞株中β3的表

6、达………………254.3降钙素可放大ECM分子对EEC中HB-EGF和LIF表达的促进作用…………………………………………………………………274.4降钙素作用于EEC可促进滋养细胞球的粘附………………304.5降钙素作用于EEC可促进滋养细胞球的铺展………………314.6外源性降钙素可促进小鼠胚泡植入……………………………345讨论……………………………………………………………………37参考文献…………………………………………………………………40综述…………………………………………………………………………46致谢…………………………………………………………………………65华中科技大学博士学

7、位论文主要缩略词表缩写英文名称中文名称CTCalcitonin降钙素ARTAssistedreproductivetechnique辅助生殖技术IVF-ETInvitrofertilizationandembryotransfer体外受精-胚胎移植ICSIIntracytoplasmicsperminjection精子卵浆内注射技术EECEndometrialepithelialcell子宫内膜上