植入早期小鼠子宫内膜形态学及Galectin3、整合素α4表达的分析

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1、----------目录英文缩略词表……………………………………………………………5中文摘要…………………………………………………………………6英文摘要…………………………………………………………………8前言………………………………………………………………………11材料和方法……………………………………………………………13结果……………………………………………………………………19讨论……………………………………………………………………37小结……………………………………………………………………44展望…………………………………………

2、…………………………45参考文献………………………………………………………………45附录……………………………………………………………………53致谢……………………………………………………………………54综述……………………………………………………………………551---英文缩略词表dday天DAB3,3-diaminobenzidine3,3-二氨基邻苯胺HEhematoxylin-eosin苏木精-伊红SPStreptavidase/Peroxidas过氧化物酶标记链酶卵白素MODmeanopticaldensity平均光密度值CA

3、Mcelladhesionmolecules细胞粘附分子FNfibronection纤维连接蛋白LNlaminin层粘连蛋白COLcollagen胶原蛋白ECMextracellularmatrix细胞外基质PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液RGDArg-Gly-Asp氨基酸小肽精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列Pprogestone孕酮IGFBP-1Insulin-likegrowthfactorbindingprotein-1胰岛素样生长因子结合蛋白-1EGFepidermalgrowthfactor表皮生长

4、因子ILinterleukin白细胞介素LIFleukemiainhibitoryfactor白血病抑制因子2---植入早期小鼠子宫内膜形态学及Galectin-3、整合素α4表达的研究摘要目的①观察动情期非妊娠及植入早期小鼠子宫内膜的光镜结构变化特点；②观察植入早期小鼠子宫内膜Galectin-3和整合素α4的表达分布状况；③探讨Galectin-3和整合素α4在植入早期小鼠子宫内膜表达的关系。方法以成年未经产雌性昆明小鼠为研究对象，雌、雄小鼠按3：1合笼过夜，第二天清晨检查雌鼠阴栓，查到阴栓者记为妊娠第1d。将50只孕鼠随机分为5组

5、，每组10只，分别于妊娠1、2、3、4、5d将5组孕鼠颈椎脱臼处死，剖腹取其子宫，另取10只动情期非妊娠小鼠子宫作对照，4%多聚甲醛固定，分别进行以下处理：①HE染色观察小鼠子宫内膜的光镜结构变化；②免疫组化SP法检测子宫内膜Galectin-3和整合素α4的表达情况；③显微成像系统拍摄图像并进行计算机图像分析系统分析HE染色和免疫组化染色结果。结果①HE染色结果：动情期非妊娠小鼠子宫内膜由腔上皮和固有层组成，固有层中包括子宫腺、基质细胞和血管等，子宫腺为单管状腺，子宫腔上皮和腺上皮均为单层柱状上皮。妊娠1～5d小鼠子宫内膜呈动态变化趋

6、势，主要表现为内膜增厚、增生和水肿，妊娠3～5d固有层中子宫腺体数量渐增多，基质细胞肥大、间隙增大，血管增生。②免疫组化染色结果显示：动情期非妊娠及妊娠1～5d小鼠子宫内膜腺上皮、腔上皮以及基质细胞中均有Galectin-3的表达。妊娠1∼5d，Galectin-3在妊娠1～2d小鼠子宫内膜表达逐渐增强，主要表达于子宫内膜腔上皮和腺上皮，妊娠3d起，表达明显增强，妊娠4d、5d呈强表达，妊娠3～5dGalectin-3在基质细胞中有阳性表达，以妊娠4d、5d表达最为明显；动情期非妊娠及妊娠1～5d小鼠子宫内膜腺上皮、腔上皮以及基质细胞中

7、均有整合素α4的表达。妊娠1∼5d，整合素α4在妊娠1～3d小鼠子宫内膜呈弱阳性表达，主要表达于子宫内膜腔上皮和腺上皮，基质细胞中几乎不表达。妊娠4～5d呈强表达，主要表达于子宫3---内膜腺上皮、腔上皮和基质细胞胞质中。③计算机图像分析系统计算Galectin-3和整合素α4在妊娠1～5d小鼠子宫内膜表达的平均光密度（MOD）值，经SPSS软件分析，两者在妊娠1～5d小鼠子宫内膜的表达具有正相关性。结论①妊娠1∼5d小鼠子宫内膜形态学改变呈动态变化趋势，以“植入窗”期变化最为明显；②妊娠1∼5d小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞的胞

8、质中持续表达Galectin-3，以妊娠4～5d表达最强，提示Galectin-3可能在小鼠胚胎植入过程中发挥重要作用；③妊娠1∼5d小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞的胞质中持续表达整合素α4，以妊娠4