兔下颌骨来源骨髓间充质干细胞体外分离培养及生物学行为的研究

《兔下颌骨来源骨髓间充质干细胞体外分离培养及生物学行为的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、单位代码：10222学号：09833021分类号：佳木斯大学口腔医学硕士专业学位论文论文题目：兔下颌骨来源骨髓间充质干细胞体外分离培养及生物学行为的研究研究生姓名：李松学科、专业：口腔临床医学导师姓名、职称：房殿吉副教授论文答辩日期：2012年6月2日佳木斯大学硕士学位论文论文题目：兔下颌骨来源骨髓间充质干细胞体外分离培养及生物学行为的研究研究生：李松专业：口腔临床医学指导教师：房殿吉单位：佳木斯大学口腔医学院学习期限：2009年9月至2012年7月学位授予单位：佳木斯大学学术诚信承诺本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行

2、的研究工作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：___________日期：____________关于论文使用授权的说明本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在

3、解密后应遵循此规定）签名：___________导师签名：___________日期：____________目录一、中文摘要1二、英文摘要2三、前言3四、文献综述4五、材料与方法15六、结果19七、讨论21八、结论23九、参考文献24十、致谢30十一、英文缩写31十二、攻读学位期间发表的论文32十三、附图33佳木斯大学硕士学位论文摘要目的：探讨兔下颌骨来源的骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs）体外分离、培养及其生物学行为。方法：取兔下颌骨中的松质骨，密度梯度离心分离法收集单个

4、核细胞，贴壁培养，取第P2或P3代检测：（1）倒置显微镜下观察细胞生长状态；（2）MTT法测定细胞增殖，测定的数据应用SPSS16.0进行统计学分析，绘制细胞生长增殖曲线；（3）克隆形成实验计算克隆形成率；（4）向成骨细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞诱导分化；（5）流式细胞仪检测细胞表面抗原标志。结果：（1）细胞经传代后形态一致，呈梭形或三角形；（2）细胞生长曲线显示下颌骨BMMSCs经历潜伏期、对数生长期和平台期，统计数据表明细胞1—7d生长增殖有统计学意义（P＜0.05）；（3）集落形成实验克隆形成率37%；（4）成骨诱导后形成钙结节，

5、茜素红染色呈阳性；成脂诱导细胞核周围出现脂滴，油红O染色呈阳性；成骨骼肌细胞诱导desmin抗原标记阳性；（5）流式细胞仪检测结果显示所获得的下颌骨BMMSCs纯度较高，CD90和CD146表面标记阳性率分别为98.7%、98.1%。结论：兔下颌骨分离出的BMMSCs，纯度较高，有强大的自我复制及增殖能力，具有多向诱导分化的潜能。关键词：兔；下颌骨；骨髓；间充质干细胞；生物学行为-1-佳木斯大学硕士学位论文AbstractObjective:Toinvestigatethemethodsofisolationandcultivatio

6、nandbiologicalbehaviourofBMMSCsderivedfromrabbitmandible.Methods:BMMSCswerecollectedfromrabbitmandibleandisolatedbydensitygradientcentrifugation.Cellswereadherentlyculturedinvitro,andP2orP3BMMSCspopulationswerecollectedandexamined:(1)Cellsgrowthwereobservedbyinvertedmic

7、roscopy.(2)ThepropagationofBMMSCsweretestedbythemethodsofMTTandagrowthcurvewasdrawnafterstatisticanalysis.(3)CFU-Fwasdetectedbyexaminationofcolonyformation.(4)Thepotentialofmulti-directionaldifferentiationintoosteoblasts、adipocytesandskeletalmusclecellswereestimatedbyre

8、latedmethods.(5)ThesurfacemarksofBMMSCsweredetectedbyflowcytometricanalysis.Results:(1)Themajorityofadherentce