活血补肾方剂对家兔创伤性骨折愈合的实验分析

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1、—1￡^—jL．日盯舌随着社会的发展，创伤骨折已经成为临床常见病及多发病，严重威胁人类的健康和影响人们的劳动能力。对于如何促进骨折愈合，国内外学者借助组织学、组织化学组织形态计量学，超微结构与生物力学等手段做了大量的实验观察，对骨折愈合机制也进行了广泛的探讨，但都还处于研究阶段。因此如何早日促进骨折愈合，是骨伤科领域的重点课题。中药治疗骨折历史悠久、疗效肯定，且方便易行、成本低廉、毒副作用低，因而加大对中药促进骨折愈合的研究具有很大的现实意义和广阔的前景。清·陈士铎指出：“内治之法，必须以活血化瘀为先，血不活则瘀不能去，瘀不去，则骨不能接。”临床上，活血化瘀是骨

2、折愈合，特别在骨折早期中的最主要治疗原则。明·陆师道在薛己《正体类要》序中说：“肢体损于外，则气血伤于内，营卫有所不贯，脏腑由之不和。”指出外伤肢体可内伤营卫气血，进而影响脏腑。由“肾主骨”，故骨折可内动于肾，使肾生、养精髓及养骨受碍。骨折后周围软组织亦可受损，故筋伤可内动于肝，肝血不充，血不养筋，则筋伤难愈，筋损束骨无力，亦可影响骨之愈合，所以骨折后又必须重视和营生新，补肝益肾。目前中医把“瘀去、新生、骨合”作为骨折愈合的过程，在内治上临床一般采用“早、中、后”三期辨证施治，而分别采用“攻利、和、补"三大法，而且现阶段关于中药方剂促进骨折愈合的临床和动物实验研

3、究已有诸多报道，但是关于在骨折早期就开始应用补’肾的报道却很少，所以本实验以此为切入点来进行研究。1．实验材料1．1活血补肾方剂组成血竭39首乌209没药lOg甘草lOg1．2制备淫羊藿159牛膝159土虫59第一章实验部分补骨脂159茯苓159川I芎lOg骨碎补159三七39赤芍159续断159乳香lOg黄芪309以上±盎然己～攮墓釜药赢敦酆焦及理鼗蛙魇k分别采用水提和醇提法提取三次，浓缩制成100％的药液，分装于玻璃瓶(500ml／瓶)备用，血竭及三七研成粉末临给药时加入药液中。(沈阳市中医研究所代为制备)1．3实验动物健康成年大耳白种家兔，雄性，60只，体

4、重2．5kg’3．5kg。购于沈阳市题必实验动物研究所。1．4仪器与试剂碱性磷酸酶试剂盒上海丰江医学科技有限公司钙试剂盒磷试剂盒SYNCHRONCX5PROX线摄片机手术器械沈阳红药上海丰江医学科技有限公司贝克曼库尔特公司沈阳市中医院提供购于沈阳东北大药房沈阳东药集团沈阳中药厂批号：06030】2．实验方法2．1动物模型制备，喂养及分组健康成年雄性大耳白种家兔共60只，体重2．5kg’3．5kg，适应性喂养一周后均造成机械性桡骨中段骨折动物模型。具体操作为：造模前一天用脱毛剂(由硫化钠配制)脱去家兔双侧前肢桡侧兔毛，范围从肘关节到腕关节。术前用20％乌拉坦(10

5、ml／kg)耳缘静脉缓慢注射实施麻醉。然后在无菌条件下取前臂中段内侧约3cm手术切口，手术切开皮肤，暴露桡骨远端，在桡骨旋前圆肌止点远端，用咬骨钳造成3mE的骨缺损n1。最后逐层缝合软组织和皮肤，清洁纱布覆盖包扎。手术时避免血管和肌肉损伤或断裂，术后不使用任何外固定。随机分为三组：活血补肾方剂组20只，阳性药物对照组20只，空白对照组20只，各组每只每天早晚分别肌肉注射青霉素60万单位和庆大霉素8万单位，以防感染，连续3天。普通饲料，单笼喂养。术后第一天开始灌胃给药，每日上午给药一次，连续4周。活血补肾方剂组，剂量为6．Og．／Kg的方药总提物，阳性药物对照组灌

6、胃给予沈阳红药药液，剂量为5．Og．／Kg，空白对照组灌胃给予等剂量生理盐水。在实验过程中各组分别于术后第l、2、3、4周分别经耳静脉取血，分离血清，进行血清生化指标检测(由沈阳市中医研究所检验科代NADZ为检测)。并且各组于术后1、2、4周拍摄X线片。2．2标本的制作及检测2．2．1X线拍片动物术后分别于1、2、4周处死前摄X线片一次，并放大成同样比例的照片，用复写纸将骨缺损及骨痂阴影描写在计算纸上，先计算出骨缺损的面积，再计算出骨痂阴影面积，求出骨痂阴影面积与骨缺损面积的百分比，进行统计学处理。2．2．2血清生化指标测定每组动物分别于术后1、2、3、4周经耳

7、静脉取血，分离血清，进行血清生化指标检测。严格按照试剂盒说明书操作(由沈阳市中医研究所检验科代为测试)o3．结果与分析3．1X线拍片各组所有动物X线拍片观察比较，活血补肾方剂用药组骨痂阴影出现早，骨痂生长速度快，骨痂阴影密度高。第二周，少部分用药组动物已有骨痂形成，第4周有更多的愈合。空白对照组在第2周时与用药组还没有明显差异，在第4周时与第2周的骨痂生长情况基本相同，与用药组相比骨痂生长较小，密度不是很高。空白对照组骨缺损处骨痂生长缓慢，至第4周仍无l例能达到骨性愈合。结果表明活血补肾方剂用药组比阳性药物对照组骨痂阴影面积平均增加10．5％；比空白对照组骨痂阴

8、影面积平均增加35．59